詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鰤魚諾卡氏菌核酸檢測試劑盒48T
貨號:YS-01P6472
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
2,2'-聯(lián)喹啉-4,4'-二甲二鈉 98%3-甲基-4-氨基 98%人維生D結(jié)合蛋白(DBP)免疫試劑盒
N,N-雙(2-)甘氨 BC 甲基吡咯-2-羧酯 98%人維生D3(VD3)免疫試劑盒
CAPSO單鈉鹽 99%1-甲基咪唑-5-甲 95%人維生D2(VD2)免疫試劑盒
3-(環(huán)已)-2-羥基-1- 99%對異酯 98%人維生C(VC)免疫試劑盒
3-(環(huán)已)-2-羥基-1- 99.5%4-硝基吡唑 97%人維生B6(VB6)免疫試劑盒
3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-1-磺 98%吡啶-3,4-二羧 98%人維生B3(VB3)免疫試劑盒
2-環(huán)己基乙磺 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二甲 97%人維生B2(VB2)免疫試劑盒
4--7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑 98%4-甲磺酰異酯 96%人維生B12(VB12)免疫試劑盒
9,9-二甲基-2,7-二溴芴 98%2-(三乙酰)吡咯 99%人維生B1(VB1)免疫試劑盒
二硫蘇糖 99%鹽多巴 98%人維生A(VA)免疫試劑盒
二硫蘇糖 用于分子生物學(xué), ≥99%(±)-α-煙酚人微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒
二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二 CP,99.0%人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)免疫試劑盒
1,8-二氮-9-芴酮 99%碳胍 99%人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)免疫試劑盒
N,N'-二環(huán)己基-4-嗎啉脒 98%異抗壞血鈉 98%人微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)免疫試劑盒
DNA ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP人微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)免疫試劑盒
鰤魚諾卡氏菌核酸檢測試劑盒48T人纖維母表面抗原(FSP)ELISA試劑盒,3-噻吩磷化紅陰離子交換蛋白1抗體
人性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒,羰酰二氫三(三基膦)銥(I)障礙自整合蛋白BAF抗體
人高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒,氘代正辛烷-d18磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體
小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)ELISA試劑盒,(S)-(-)-α-甲氧基-α-(三甲基)磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒,(S)-(-)-α-甲氧基-α-(三甲基)磷化B-Raf抗體
大鼠生長激釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒,3-(Boc-氨基)哌啶磷化B-Raf抗體
大鼠促性腺激釋放激(GnRH)ELISA試劑盒,3-(Boc-氨基)哌啶磷化B-Raf抗體
大鼠催乳(PRL)ELISA試劑盒,2-(二基膦基)甲磷化B-Raf抗體