試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
丙酮酸羧化酶微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | YS-01S7057 |
商品介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖異生過(guò)程的第一個(gè)限速酶,在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。
測(cè)定原理:
PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,蘋(píng)果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋(píng)果酸和NAD+,在340nm下測(cè)定NADH氧化速率,即可反映PC活性
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。
2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。
測(cè)定步驟:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
兔白調(diào)節(jié)(LR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 莢膜紅細(xì)CPOI (RSRII)
兔肥大類胰蛋白(MCT)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒微桿屬M(fèi)UNI (MFEI)
兔髓鞘型脂肪結(jié)合蛋白(FABP8)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒辣椒盤(pán)孢M(jìn)UNI (MFEI)
兔雷帕霉靶蛋白(mTOR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 橙鱗傘8PSP5II (PPUMI)
兔葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 大腸埃希氏SSPI
兔紐蛋白(VCL)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒橙灰紫旋鏈霉SSPI
兔色b-561(CYB561)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 腸沙門(mén)氏腸亞種波恩血清型BSP143I (SAU3AI)
兔信號(hào)3B (SEMA3B)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 地衣芽孢桿BSP143I (SAU3AI)
兔神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 烏洛托品甲速測(cè)管HINFI
兔新生甲狀腺(Neo-T4)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒茶藨子葡萄座腔HINFI
兔抗磷壁抗體(TA)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 弗雷德里克斯堡假單胞HINFI, HC
兔胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒豇豆慢生根瘤MBOI
兔信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒聚生殼MBOI
兔B活化因子受體(BAFFR)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黑曲霉MBOII
兔尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒有柄樹(shù)舌MBOII
丙酮酸羧化酶微量法谷??贵wHuman UCK1 ELISA Kit蛋白裂解(一種新的癌基因)IHC WB抗體流式組化
絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體Human UCK2 ELISA Kit髓樣分化蛋白抗體流式組化
G蛋白結(jié)合蛋白5抗體Human UCKL1 ELISA Kit鼠抗人心肌肌凝蛋白(平滑肌)IHC WB 單抗
腫瘤/抗原家族4亞型7抗體Human CLC(Eosinophil lysophospholipase) ELISA Kit神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體流式組化
GDNF家族受體α3抗體 GFR α3Human UBQLN3 ELISA Kit谷受體2B抗體流式組化
甘受體β/GlyR β抗體Human UCRC ELISA Kit神經(jīng)纖毛蛋白-2抗體流式組化
神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體Human UBQLNL ELISA Kit磷脂磷2C抗體流式組化
甘肽受體2抗體Human UFC1 ELISA Kit磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體流式組化