服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
定量PCR方法:
a、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中,待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測(cè)模板不被酶切,可通過(guò)電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開(kāi),分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開(kāi)來(lái),分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ梢杂赡约禾峁?,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
二、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
硫代嗎啉 98%芴甲氧羰酰氯 98%小鼠神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒
綠草定 分析標(biāo)準(zhǔn)品芴甲氧羰酰 99%小鼠神經(jīng)粘附分子1(NCAM1)免疫試劑盒
2-乙酰檸檬三乙酯 99%4-(羥基)苯氧基乙 98%小鼠神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒
三(硅基)硅烷 90%苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六磷酯 99%小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒
溴化 99%1-羥基-苯并-三氮唑(無(wú)水) 99%小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)免疫試劑盒
99.99%(劇品)3-羥基-1,2,3-苯并三-4(3H)-酮 98%小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)免疫試劑盒
水質(zhì)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六磷酯 99%小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)免疫試劑盒
(+)-γ-維生E 96%1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑 99%小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒
3,5,5-基己 ≥95%, KosherN-羥基-5-降稀-2,3-二酰亞 99%小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒
三(2-呋喃基)膦 99%N-羥基琥珀酰亞 98%小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒
雙硫磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品N-羥基硫代琥珀酰亞 98%小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒
四乙基氯,一水 99%4-羥甲 99%小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒
四乙基硫氫銨 色譜級(jí)3-羥基-9H-占噸-9-酮 98%小鼠上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒
四乙基硫氫銨 99%1,2-二氫-2-異丁氧基喹啉-1-甲異丁酯 98%小鼠山梨脫氫(SDH)免疫試劑盒
(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘 >99%, ee >98%異烯基氯甲酯 98%小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌48T 0.1PCR管胰島(INS)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人N-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷腺抗體
煌綠瓊脂N-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨精氨tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體
WILKINS-CHALGREN瓊脂用于厭氧菌的分離培養(yǎng)(Acumedia 方法)3-甲氧基苯共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體
小鼠顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒,3-甲氧基苯孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1)
小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒,3-甲氧基苯脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體
小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒,氯(基膦)金芳香基硫酯H抗體
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒,敵草溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體
大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒,乙基三苯基溴化磷載脂蛋白1抗體