詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒48T
貨號:YS-01P6714
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
O-叔丁基-D-酪氨 98.5%乳果糖 99%大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)免疫試劑盒
O-芐基-L-酪氨芐酯鹽鹽 98.5%溶菌,雞蛋白 40000U/mg大鼠封閉蛋白4(CLDN4)免疫試劑盒
O-芐基-L-酪氨甲酯鹽鹽 98.5%D(-)-來蘇糖 99.0% 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
L-4-溴氨 98%L-來蘇糖 99%大鼠分泌型磷脂A2(sPLA2)免疫試劑盒
D-4-溴氨 98%L-(-)-半乳糖 99%大鼠肺炎支原體(MP)抗體免疫試劑盒
Boc-3-(1-萘基)-D-氨 98%L-(-)-葡萄糖 98%大鼠肺炎病抗體(PV-Ab)免疫試劑盒
Boc-L-3-(1-萘基)-氨 99%D-甘露糖 99%大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)免疫試劑盒
Boc-3-(2-萘基)-D-氨 99%D-甘露糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
Boc-3-(2-萘基)-L-氨 99%D(+)-密二糖,一水 99%大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
BOC-L-3-(3-吡啶基)-氨 99%D(+)-密二糖,一水 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
Boc-L-β-高氨 98%甲基-а-D-吡喃半乳糖 98%大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)免疫試劑盒
Boc-L-β-高精氨對甲磺鹽 98%3-甲基-2-并噻唑酮腙鹽鹽,水合 98%大鼠肥胖抑制免疫試劑盒
Boc-L-beta-谷氨 5-芐酯 98%麥芽三糖 96%大鼠肥大類胰凝乳蛋白免疫試劑盒
Boc-L-beta-高谷氨 6-芐酯 98%麥芽三糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品大鼠肥大類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒
Boc-L-beta-高異亮氨 98%D(+)松三糖,一水 99%大鼠防御5 免疫試劑盒
水生動物病害基因組DNA/RNA提取試劑盒48T賴 氨脫羧肉湯2,6-二甲氧基周期依賴性激10
L-天門冬氨鉀3-肼鹽鹽8號染色體開放閱讀框86抗體
BOC-L-脯氨3-肼鹽鹽磷化分裂周期蛋白25B抗體
L-甲狀腺3-肼鹽鹽磷化分裂周期蛋白25B抗體
二氫楊梅 DihydromyricetinLapab磷化半胱蛋白蛋白6抗體
T4 DNA聚合N-基-4-哌啶酮9號染色體開放閱讀框172抗體
多粘菌E硫鹽N-基-4-哌啶酮磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑
β-谷甾醇1-(3-芐基)哌表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。