詳細(xì)介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:谷胱甘肽過氧化物酶3ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Glutathione peroxidase 3
檢測范圍:31.25μIU/ml~1000μIU/ml
貨號:YS-E98572
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
PTPRS胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體
Pet1蛋白酪氨酸磷酸酶PTPσ抗體
Plexin A3ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體
phospho-PTPN6(Tyr564)神經(jīng)叢蛋白A3抗體
PPP4C磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體
PASD5絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶4C抗體
PCPTP1神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體
PHYHIP蛋白酪氨酸磷酸酶受體PCPTP1抗體
PNMA1植烷酰輔酶A羥化酶2相互作用蛋白抗體
POU3F3旁瘤抗原MA1抗體
PTBP2大腦蛋白1抗體
Phospho-PPAR Gamma (ser273)核糖核酸結(jié)合蛋白2抗體
Presenilin 1 + 2磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ
PRRSV早老素蛋白1+2抗體
Phospholipase C beta 2豬藍(lán)耳病病毒抗體
谷胱甘肽過氧化物酶3ELISA檢測試劑盒SELP ProteinRat重組大鼠 SELP / P Selectin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
1,3-丙二醇 英文名稱:1, 3- propylene glycol 規(guī)格:100mg 保存:-20℃,避光
YNB培養(yǎng)基100g用于基因工程中酵母菌的發(fā)酵培養(yǎng)
OSMR ProteinHuman重組人 OSMR / IL31RB 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA ProteinH5N1重組甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
溴丙胺肽林 英文名稱:Propantheline bromide 規(guī)格:50mg 保存:-20℃,避光
CKMT1A ProteinHuman重組人 CKMT1A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LIF ProteinMouse重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
相思子 英文名稱:Abrin 規(guī)格:5g 保存:-20℃,避光
?;撬?/font> 英文名稱:Taurine 規(guī)格:20mg 保存:-20℃,避光
HA ProteinH5N3重組甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
AGRP ProteinMouse重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Bile Lactose Medium
SCG2 ProteinHuman重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標(biāo)簽)