詳細介紹
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:維生素K1ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Vitamin K1
檢測范圍:0.25ng/mL~8ng/mL
貨號:YS-E97412
性狀:盒狀液體。
實驗方法:競爭法、一步法、夾心法、高敏法等。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.0 Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.0 常溫保存
2 ug YEP365 YEP365 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pDsRed-Mito pDsRed-Mito 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEXP-Lib pEXP-Lib 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pSIREN-RetroQ-ZsGreen pSIREN-RetroQ-ZsGreen 低溫運輸,-20℃保存
50T 牛海綿狀腦病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
20L 濕法電轉(zhuǎn)液(干粉) Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存
50T 創(chuàng)傷弧菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
1 管 C43(DE3)大腸桿菌 C43(DE3) E.coli Strain -80℃保存
2 ug pcDNA3.1(-)/GFP pcDNA3.1(-)/GFP 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 WISH細胞株 WISH 低溫運輸和保存
50T 軍團菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) 低溫運輸,-20℃保存
50T 蟹特定基因序列PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
維生素K1ELISA檢測試劑盒XLD瓊脂培養(yǎng)基平板 用于革蘭氏陰性腸桿菌特別是志賀氏菌和沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。(GB、ISO、美國FDA、EP、USP)... 90mmX20個
XLD瓊脂瓶裝顆粒培養(yǎng)基 用于臨床標(biāo)本及食品中沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng) 250g
XLT-4瓊脂平板 從臨床標(biāo)本 、環(huán)境和食品標(biāo)本中分離沙門氏菌和志賀氏菌的高選擇性培養(yǎng)。 90mmX20個
γ射線滅菌指示條 當(dāng)暴露于高于10kGy劑量的γ輻射中時,γ射線指示標(biāo)簽由黃色變?yōu)榧t色。 1000片/卷
阿拉伯糖生化管 細菌生化鑒定 20支/盒
氨芐青霉素麥康凱配套試劑 用于致病性嗜水氣單胞菌的選擇性分離培養(yǎng)(SN/T 0751-2010) 10支/盒
氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 用于致病性嗜水氣單胞菌的選擇性分離培養(yǎng)(SN/T 0751-2010) 250g
氨基酸脫羧酶對照生化鑒定管 細菌生化鑒定 20支/盒
氨基酸脫羧酶試驗基礎(chǔ)培養(yǎng)基 供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生氨基酸脫羧酶用 100g
班氏試劑(葡萄糖酸鹽試劑) 用于葡萄糖酸鹽利用試驗。 10ml/支
阪崎腸桿菌生化鑒定盒 阪崎腸桿菌的10項生化反應(yīng)。(參考“食品安家標(biāo)準”GB4789.40-2010) 11種×10次/盒
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基 供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計數(shù) 1000ml