詳細介紹
CBZ-L-脯氨酸CAS號:1148-11-4產(chǎn)品概述:
CBZ-L-脯氨酸
英文名稱:N-CBZ-L-Proline;Z-Pro-OH;N-Benzyloxycarbonyl-L-proline
其他名稱:N-芐氧羰基-L-脯氨酸;N-羰芐氧基-L-嘌呤
CAS號:1148-11-4
級別:Purum
含量:≥99.0%
熔點:75~77℃
比旋光度:-59~-61º(C=2,ACOH)
性狀(以下信息僅供參考):白色細粉末晶體
用途:用于生化試劑,多肽合成
保存:RT
公司優(yōu)勢:
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Western Blot操作方法:
1.培養(yǎng)細胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應(yīng)在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復(fù)凍融。
2.組織樣品的制備:
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應(yīng)體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見細胞培養(yǎng)的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當?shù)纳蠘?buffer中,混勻后靜置3小時使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持數(shù)月。)
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