詳細介紹
磷脂酶A2CAS號:9001-84-7產(chǎn)品概述:
磷脂酶A2
英文名稱:PLA2;Lecithinase A;Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase;Phospholipase A2
其他名稱:磷酯酶A2
CAS號:9001-84-7
級別:BR
來源:Crotalus durissus terrificus venom
Specific activity:≥200u/mg
活力定義:One Unit releases one micromole of acid from soybean lecithin per minute at 25℃, pH 8.9
產(chǎn)品描述:Phospholipase A2 is a member of the class of heat-stable, calcium-dependent enzymes catalyzing the hydrolysis of the 2-acyl bond of 3-n-phosphoglycerides. The enzyme has a molecular weight of 30,000 daltons. Phospholipase A2 is activated by Ca2+. It is inhibited by zinc, barium, and manganese ions. Activity values for phospholipase A preparations which are derived from titrimetric assay procedures can be quite dependent on source and type of lecithin, its preparation as a substrate emulsion, other ponents of the reaction mixture, and the method and instrumentation used
性狀(以下信息僅供參考):粉末。EC3.1.1.4
用途:本品僅供科研,不得用于其它用途
保存:-20℃
公司優(yōu)勢:
我司為專業(yè)的生物試劑公司,不僅代理各種知名的國際國內(nèi)品牌,還注重自身的和,具備一定的專業(yè)背景和實力基礎。我司成立較早,在殘酷的競爭環(huán)境中屹立至今,這與我們誠信至上以及注重專業(yè)實力的信念是離不開的。經(jīng)過多年的摸爬滾打,我司擁有屬于自己的營銷理念和方法。我司定位明確,客戶精準,眼光高遠,立足于當下前沿性的科研領域,提供當前科研所需的試劑以及耗材產(chǎn)品,客戶遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業(yè)。關于磷脂酶A2CAS號:9001-84-7訂購事宜以及合作詳情可點擊這里咨詢我們。
Western Blot操作方法:
1.培養(yǎng)細胞蛋白質(zhì)樣品的制備:
1)在合適的鹽濃度下,應保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復性。
2)選擇合適的表面活性劑和還原劑,破壞所有非共價結合的蛋白質(zhì)復合物和共價鍵二硫鍵,使其形成一個各自多肽的溶液。
3)盡量去除核酸,多糖,脂類等干擾分子。
4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾,制備過程應在低溫下進行,以避免細胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)
5)樣品建議分裝成合適的量,然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存,但要注意不要反復凍融。
2.組織樣品的制備:
手術切除的組織塊迅速置于預冷的0.95生理鹽水中,漂洗數(shù)次,以清潔表面的血跡,將組織稱量后切成幾個較小的組織塊放入機戒組織勻漿器中,按組織凈重,裂解液=1:10的比例,加入相應體積的裂解液進行勻漿,離心收集上清(如有粘稠物可超聲處理,具體方法見細胞培養(yǎng)的樣品制備,也可以冷凍干燥降解核酸后,將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當?shù)纳蠘?buffer中,混勻后靜置3小時使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解,有5分鐘即可,4度離心收集。)加入Laemmli樣品緩沖液(視蛋白樣品濃度,以1:1或1:2的比例混合)強力混勻,樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘,10000g離心10分鐘,取上清液,將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中,至此,電泳樣品已準備就緒(樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存,-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持數(shù)月。)
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