詳細(xì)介紹
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
PCR基本操作:
?
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
長須白蛉PCR檢測試劑盒 | Lutzomyia longipalpisPCR | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
長須白蛉PCR檢測試劑盒PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
NeuN 神經(jīng)元核原體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC124 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124體
Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1體
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC82 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82體
NGB/neuroglobin 紅蛋白/神紅蛋白/神經(jīng)球蛋白體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC68/se57-1 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68體(皮膚T淋巴細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)原)
NeuroD1/NEUROD 神經(jīng)細(xì)胞分化因子1體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83體
Neurofascin/Nfasc155 神經(jīng)束蛋白155體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC120 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120體
Neurogenin 2/NGN2 神經(jīng)元2體進(jìn)口/國產(chǎn)CCDC23 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23體二標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)口/國產(chǎn)AKR1A1 脫酶1體進(jìn)口/國產(chǎn)TB-Ab IgG(Human tuberculosis antibody IgG) ELISA Kit 人結(jié)核桿體IgG小鼠新生狀(NN-T4)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)9-芴標(biāo)準(zhǔn)品*ALAD δ酰脫水酶體進(jìn)口/國產(chǎn)CP(Human cicatricial Pemphigoid) ELISA Kit 人瘢痕性天皰瘡體大鼠新生狀(NN-T4)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)2-標(biāo)準(zhǔn)品*TPTE 腫瘤/丸原44體進(jìn)口/國產(chǎn)HBV preS2Ab(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人型肝炎病前S2體人游離三狀原(Free-T3)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)α-紫羅標(biāo)準(zhǔn)品*ALDH16A1 醛脫酶16家庭A1體進(jìn)口/國產(chǎn)T ELISA Kit 大鼠小鼠游離三狀原(Free-T3)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口、國產(chǎn)
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒供應(yīng)商 | Absidia corymbiferaPCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:
?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
碳銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 8000-73-5 Ammonium Carbonate (AS) 進(jìn)口、國產(chǎn) 2g
化銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 12125-02-9 Ammonium Chloride 進(jìn)口、國產(chǎn) 200mg
二銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 7783-28-0 進(jìn)口、國產(chǎn) 1g
異戊巴比CII標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 57-43-2 Amobarbital CII 進(jìn)口、國產(chǎn) 200mg
阿莫地標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 6398-98-7 Amodiaquine Hydrochloride 進(jìn)口、國產(chǎn) 500mg
阿莫平標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 14028-44-5 Amoxapine 進(jìn)口、國產(chǎn) 200mg
阿莫西林標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 61336-70-7 Amoxicillin 進(jìn)口、國產(chǎn) 200mg
阿莫西林相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 進(jìn)口、國產(chǎn) 15mg
RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-24(膀胱變移細(xì)胞癌)
CL-0111HL-7702(人肝正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IgG2b Others Mouse 小鼠 IgG2b-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
OP9小鼠骨髓質(zhì)細(xì)胞 OP9 mouse bone marrow somal cells a-MEM培養(yǎng)+20%FBS
LIF Protein Mouse 重組小鼠 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng) 100mL
傘枝梨頭霉PCR檢測試劑盒供應(yīng)商
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)