詳細(xì)介紹
PCR基本操作:
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原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)RTPCR | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
20mg/支CARPX/CA10 碳酐酶相關(guān)蛋白體(蛋白15)ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)
Acetazolamide20mg/支CA12 碳酐酶12體ELISA Kit for Protein C Receptor, Endothelial (PROCR)
Glacial Acetic Acid20mg/支IGFR3/CD16 FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III體ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
Acetohexamide20mg/支CD200/MOX1 膜糖蛋白CD200體ELISA Kit for Protein C Receptor, Endothelial (PROCR)
Acetohydroxamic Acid20mg/支CD66c/CEACAM6 癌胚原相關(guān)細(xì)胞粘附分子體ELISA Kit for Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
Acetone20mg/支CPA1/Carboxypeptidase A 胰羧肽酶A1體ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF)
Acetophenazine Maleate20mg/支CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2體ELISA Kit for Eosinophil Chemotactic Factor (ECF)
20mg/支CPB1/Carboxypeptidase B1 胰羧肽酶B1體ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)BR,90%98%100gTox Ab含量測定Anti-ADAMTS7 整合樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7體Anti-ADAMTS7 整合樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7體48T/96T94%5gNO
BR,90%98%25gSYA674 T含量測定Anti-ADAMTS7(NT) 整合樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7體 (N端體)Anti-ADAMTS7(NT) 整合樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7體 (N端體)48T/96T98%1gNOS
BR,90%98%5gIgG3含量測定Anti-DRADA (N terminal) 雙鏈RNA苷脫酶體(N端)Anti-DRADA (N terminal) 雙鏈RNA苷脫酶體(N端)48T/96T98%5gINS