實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作：?

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
phospho-CDKN1A/P21 (Ser146)  化p21蛋白體進口/國產(chǎn)GPRIN1  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1體

phospho-CDKN1A/P21 (Ser130)  化p21蛋白體進口/國產(chǎn)GPRIN2  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2體

CDKN1B/P27kip1  P27體/周期依賴激酶抑制進口/國產(chǎn)GPRIN3  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3體

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser10)  化P27體/周期依賴激酶抑制進口/國產(chǎn)DIRC2  干擾腎細(xì)胞癌蛋白2體

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr157)  化P27體/周期依賴激酶抑制體進口/國產(chǎn)p400  p400蛋白體

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr187)  化P27體/周期依賴激酶抑制體進口/國產(chǎn)DNAJC7  DNAJC7蛋白體

phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser178)  化P27體/周期依賴激酶抑制體進口/國產(chǎn)VAV1  鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1體PDGF-B英文名稱：CCL3二嘧啶酶相關(guān)蛋白2體

PDGFRA英文名稱：muscarinic Acetylcholine Receptor 1細(xì)胞色P450ⅡE1體

PDGF Receptor beta英文名稱：MAG趨化因子受體1體

PDK4英文名稱：MEK1 + MEK2化原癌因c-Raf體

PEDF英文名稱：MEK2化致癌因C-Myc體

PEG10英文名稱：MatriptaseCD33體

PEPT1英文名稱：MBP化原癌因c-kit體

SLC15A2英文名稱：MelanA化原癌因c-Jun體
漢坦病毒型PCR檢測試劑盒說明書原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。