詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 人胚肺二倍體細(xì)胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法 1:2-1:4
傳代情況 P21
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Pro-ANP ELISA Kit 大鼠前心鈉肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體 規(guī)格 0.2ml
PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長因子BB 96T
7-Mar 英文名稱: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 0.1ml
ABLIM3 英文名稱: 肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體 0.2ml
Anti-ATR/ACTR(phospho Ser428) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化ATR抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b) 鋅指脂蛋白-1b(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-SIGLEC11 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Oncostatin M 癌基因蛋白抑瘤素M抗體 規(guī)格 0.2ml
NGF Kit Human 人 NGF / NGFB ELISA配對抗體 ELISA
T2R50 英文名稱: 味覺受體蛋白家族2亞基50抗體 0.2ml
Cytochrome P450 17A1 英文名稱: 細(xì)胞色素C P450 17A1抗體 0.1ml
Anti-SIGLEC11 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人載脂蛋白L1(Apolipoprotein L1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠乙酰膽堿酯酶(AchE)ELISA試劑盒,英文名:AchE ELISA KiISA Kit for Human Laminin subunit beta-1大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒,英文名:Free-T3 ELISA KiISA Kit for Human Molybdenum cofactor sulfurase大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒,英文名:CYP2E1 ELISA KiISA Kit for Human Mucin-20大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒,英文名:ALD ELISA KiISA Kit for Human Oxysterols receptor LXR-alpha大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒,英文名:Gzms-A ELISA KiISA Kit for Human 2'-5'-oligoadenylate synthase 1大鼠胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)ELISA試劑盒,英文名:CSE ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylinositol 3, 4, 5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein大鼠雌激素(E)ELISA試劑盒,英文名:E ELISA Kit
人花生四烯酸-15-脂加氧酶B(ALOX15B)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒,英文名:gp130 ELISA KiISA Kit for Human Podocalyxin大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒,英文名:SDC1 ELISA KiISA Kit for Human Eosinophil cationic protein大鼠阻抑素(PHB)ELISA試劑盒,英文名:PHB ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA試劑盒,英文名:PAI1 ELISA KiISA Kit for Human Serpin A12大鼠羥烷基輔酶A脫氫酶β(HADHβ)ELISA試劑盒,英文名:HADHβ ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒,英文名:MMP12 ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8大鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)ELISA試劑盒,英文名:DIO3 ELISA Kit
羊抗小鼠IgG-純化抗體 1mg/10mg 國產(chǎn)
XDH 英文名稱: 氧化酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體 規(guī)格 0.1ml
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類皰疹病毒8抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Dynamin 3 英文名稱: 酶動力蛋白3抗體 0.1ml
Anti-phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS培養(yǎng)SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信號識別顆??贵wMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAL/MPV17 T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基維生素D3 96T
RNF39 英文名稱: 環(huán)指蛋白39抗體 0.2ml
CNPase 英文名稱: C型鈉尿肽抗體 0.1ml
Anti-IGFBP3 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml