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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿(mǎn)，光澤度好，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶(hù)！
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱(chēng) SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 293細(xì)胞株插入SV40 T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生株稱(chēng)為293T。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1：
2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:11,12；D13S317:12,14；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D19S433:18；D21S11:28,30.2；D2S1338:19；D3S1358:15,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；TH01:7,9.3；TPOX:11；vWA:16,19
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.5ml
Hpt/HP ELISA Kit 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 96T
CDCA1 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser446) 英文名稱(chēng)： 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
Anti-STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
VCAM-1 人血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Calcitonin 降鈣素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NIR2 膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit 人溶酶體相關(guān)膜蛋白2 96T
TP53TG3 英文名稱(chēng)： p53靶蛋白3抗體 0.2ml
CENPN 英文名稱(chēng)： 著絲粒蛋白N抗體 0.1ml
Anti-Calcitonin 降鈣素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人肌動(dòng)蛋白束蛋白2(FSCN2)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL小鼠前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)ELISA試劑盒，英文名：PKR1 ELISA Kit人CC趨化因子受體4(CCR-4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒，英文名：TRH ELISA KiISA Kit for Human Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒，英文名：Orexin A ELISA Kit人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒，英文名：CD44 ELISA KiISA Kit for Human CD40 ligand小鼠半乳糖凝集素3(Galectin-3)ELISA試劑盒，英文名：Galectin-3 ELISA Kit人Dickkopf樣蛋白1(Dickkopf-like protein 1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒，英文名：Lpa ELISA KiISA Kit for Human Endothelin-converting enzyme 1小鼠信號(hào)素7A(SEMA7A)ELISA試劑盒，英文名：SEMA7A ELISA Kit
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)ELISA試劑盒，英文名：MMP14 ELISA Kit人脂閥結(jié)構(gòu)蛋白-1(Flotillin-1) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA試劑盒，英文名：TREM1 ELISA KiISA Kit for Human Coagulation factor XIII A chain小鼠趨化因子C-C-基元受體8(CCR8)ELISA試劑盒，英文名：CCR8 ELISA Kit人生長(zhǎng)抑制特異性蛋白1(GAS1)ELISA試劑盒人96T0.312-20ng/mL小鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)ELISA試劑盒，英文名：CTNNβ1 ELISA KiISA Kit for Human Alanine aminotransferase 1小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA試劑盒，英文名：ALOX12 ELISA Kit人70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)ELISA試劑盒，英文名：SCG2 ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha-inducible protein 6小鼠叉頭框蛋白A2(FOXA2)ELISA試劑盒，英文名：FOXA2 ELISA Kit
水性封 10ml 適用于AEC.AP-Red. BCIP/NBT等
WDFY3 英文名稱(chēng)： WDFY3蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser353) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格 0.1ml
gp130/IL-6R 白介素-6受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DZIP3 英文名稱(chēng)： E3泛素蛋白連接酶dzip3抗體 0.2ml
Anti-ADK/AK 腺苷酸激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞；293T培養(yǎng)Anti-phospho-SHC (Tyr427) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗體 Anti-NF-κBp50 0.1ml
5-HTR2B 英文名稱(chēng)： 5-羥色胺受體2B抗體 0.1ml
Ezrin 英文名稱(chēng)： 埃茲蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg