詳細介紹
小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9價格
形態(tài)特性 成纖維細胞
品牌 貼壁生長
特征特性 OP9細胞株源自新生的op/op 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變,它不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。 OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養(yǎng)以誘導(dǎo)胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復(fù)雜的胚胎結(jié)構(gòu)。這個系統(tǒng)對研究造血細胞的發(fā)育和分化的分子機理有用。
培養(yǎng)條件 α-MEM:
Alpha
小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9價格貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Parvalbumin/FITC 熒光素標記微白蛋白/細小清蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/FITC 熒光素標記羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
人巨細胞病毒UL23抗體 anti-HCMV UL23/HHV5 UL23 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
Fibrinogen beta chain 英文名稱: 纖維蛋白原β鏈抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyhr927) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-human IgM/FITC 熒光素標記羊抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-B7-H1/CD274 程序性死亡配體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Afadin(Ser1718) 磷酸化絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MGMT 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Upstream Binding Protein 1 英文名稱: 上游結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
CCK39 英文名稱: 膽囊收縮素39抗體 0.1ml
Anti-B7-H1/CD274 程序性死亡配體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1) 滑膜細胞凋亡抑制物1(抗體) 0.5mg
JIP3 英文名稱: 原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Collagen V Ⅴ型膠原抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Apo-E/FITC 熒光素標記載脂蛋白E抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh TTF-1 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 規(guī)格 0.1ml
ANti-FHIT/FITC 熒光素標記抗脆性組氨酸三聯(lián)體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠顱蓋成纖維細胞;OP9價格CT-1 ELISA Kit 大鼠心肌營養(yǎng)素1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Wee1 (Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GABRG2/GABA A Receptor gamma 2 γ氨基丁酸γ2受體抗體 規(guī)格 0.1ml
bFGF-9(Human basic fibroblast growth factor 9) ELISA Kit 人堿性成纖維細胞生長因子9 96T
Nidogen 英文名稱: 巢蛋白1抗體 0.2ml
ALDH1 英文名稱: 乙醛脫氫酶1型抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Wee1 (Ser642) 磷酸化WEE1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml