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          目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> 固定細(xì)胞蛋白提取試劑盒
          
		
          
	
          
    	
          
		
          
			
          固定細(xì)胞蛋白提取試劑盒
          
		
          
		
          
			
		
          
	
          
	
          
		
          
			
          
           				    
            
			        
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			                固定細(xì)胞蛋白提取試劑盒
			            
            
			        
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          更新時(shí)間：2024-11-24 16:23:59瀏覽次數(shù)：86評(píng)價(jià)
          
						
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                      產(chǎn)品概述                                 product description                                                                                                                              貝博® BBproExtra® 固定細(xì)胞蛋白提取試劑盒適用于從各種固定的細(xì)胞樣本中提取總蛋白，適用于乙醇固定、甲醛固定、多聚甲醛固定、其它混合固定液固定的細(xì)胞樣本。   提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便，提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。   貝博® BBproExtra® 可以提供針對(duì)動(dòng)物細(xì)胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。   貝博® BBproExtra® 可以提供針對(duì)細(xì)胞膜、核、胞質(zhì)、線粒體、溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、外泌體等細(xì)胞不同部位的蛋白提取試劑盒。
					
          
					
					
                               
                                   
                                       保存溫度                         
                                   
                                       2-8℃                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       注意事項(xiàng)                         
                                   
                                       1.蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
          2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
          3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       有效期                         
                                   
                                       一年                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       檢測(cè)方法                         
                                   
                                       WB,IP等                           
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       適用樣本                         
                                   
                                       動(dòng)物細(xì)胞                         
                               
                           
                                                                                                           
                               
                                   
                                       產(chǎn)品應(yīng)用                         
                                   
                                       WB,IP等                           
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       儀器準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心機(jī)
          2.振蕩器
          3.渦旋混勻器
          4.移液器
          5.冰箱
          6.冰盒                          
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       試劑準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.PBS緩沖液 
          2.蛋白定量試劑盒                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       耗材準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心管
          2.吸頭
          3.一次性手套                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       使用注意事項(xiàng)                         
                                   
                                        使用注意事項(xiàng)：
          ? 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。

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                                       使用方法                         
                                   
                                       1. 提取液制備：
          每500ul蛋白提取液中加入5ul蛋白提取液B，混勻后備用。
          2. 每1×107個(gè)細(xì)胞中加入500ul蛋白提取液，渦旋振蕩10秒。
          3. 在恒溫器（Heat Block）或水浴鍋中100℃保溫20分鐘。
          4. 渦旋振蕩10秒混勻。
          5. 在恒溫器（Heat Block）或水浴鍋中60℃保溫1-2小時(shí)。
          6. 渦旋振蕩10秒混勻。
          7. 在12000×g條件下離心10分鐘。
          8. 將上清吸入另一干凈離心管，即可得到總蛋白。
          9. 將上述蛋白提取物定量后分裝保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       常見(jiàn)問(wèn)題分析                         
                                   
                                       1.蛋白濃度低？
          固定的細(xì)胞組織的蛋白質(zhì)回收率較低，甲醛固定樣本回收率在30%左右。
          需要加大細(xì)胞組織樣本上樣量，調(diào)整提取液用量來(lái)調(diào)整蛋白濃度。

          2.WB做不出來(lái)？
          固定樣本的蛋白質(zhì)回收率在30%左右。低豐度蛋白通常較難檢出。
          甲醛固定的蛋白質(zhì)末端基團(tuán)與甲醛之間形成交聯(lián)鏈，各種氨基，亞氨基及酰氨基，肽，胍基，羥基，SH和芳香環(huán)等都會(huì)參與甲醛固定蛋白質(zhì)的基團(tuán)反應(yīng)，在這個(gè)過(guò)程中，絕大部分常規(guī)的暴露抗原決定基團(tuán)遭到破壞，從甲醛固定樣本回收的蛋白質(zhì)做WB成功的概率較低，選用抗體說(shuō)明書(shū)上同時(shí)可以做WB和IHC的抗體。
                                   
                               
                           
                                                                                       
          

                                                                                    				
          

			
          
		
          
	
          
	
          
	
	
	 		 
	
          
		
          
			
          
				
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