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          目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞凋亡>> 吖啶橙染色試劑盒

          吖啶橙染色試劑盒
          • 吖啶橙染色試劑盒
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌
          • 型號
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地
          屬性

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          更新時間:2024-11-25 19:45:47瀏覽次數(shù):96評價

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          產(chǎn)品概述 product description 吖啶橙(Acridine Orange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長為488nm,吸收波長為515nm。它與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,復合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細胞膜,使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
          保存溫度
          2-8℃避光
          注意事項
          1.本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
          2.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
          3.樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
          4.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
          5.AO有毒,避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
          有效期
          6個月
          檢測方法
          1.流式細胞儀
          2.熒光顯微鏡

          適用樣本
          1.懸浮細胞
          2.貼壁細胞
          產(chǎn)品應用
          1.流式細胞儀
          2.熒光顯微鏡

          試劑準備
          1.PBS 緩沖液(pH7.4,實驗室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液(1X))
          2.或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
          耗材準備
          1.離心管
          2.吸頭
          3.一次性手套
          使用注意事項
          1.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,避免開蓋時液體灑落。
          2.細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
          3.染色后立即進行分析。
          4.染色時間根據(jù)不同樣本的實際染色結(jié)果做相應調(diào)整。
          使用方法
          1、 染色緩沖液的配制:
          根據(jù)樣品數(shù)按下列比例配制染色緩沖液。 取100μL試劑B加900μL無菌去離子水稀釋,混勻即成染色緩沖液。
          2、 收集樣本細胞,細胞數(shù)量在10X105個以內(nèi)。
          3、 用PBS洗滌細胞兩次。
          4、 用500μL-1ml 染色緩沖液將細胞重懸,使細胞濃度約106個/ml。
          5、 取95ul細胞懸液,加入5ul AO染色液。
          6、 輕輕混勻后4℃避光孵育10-15分鐘。
          7、 滴加至載玻片上,用蓋玻片封片。
          8、 熒光顯微鏡檢測結(jié)果。激發(fā)波長為488nm。

          結(jié)果分析 :
          在熒光顯微鏡下,選用488nm激發(fā)光鏡檢:AO染色正常細胞DNA呈均勻黃色或黃綠色。當細胞凋亡時,染色質(zhì)濃縮,細胞核碎裂成點狀,被染成大小不一、致密濃染的綠色顆?;螯S綠色碎片。

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