目錄:上海貝博生物科技有限公司>>氧化應(yīng)激>>活性氧檢測(cè)>> BB-46052活性氧檢測(cè)試劑盒 (ROS)紅色
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更新時(shí)間:2024-11-28 15:02:20瀏覽次數(shù):177評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
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貨號(hào) | BB-46052-100T | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
一、 探針標(biāo)記
原位標(biāo)記:僅適用于貼壁培養(yǎng)細(xì)胞。
1. 按照1:1000-2000用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋O06探針。
2. 去除細(xì)胞培養(yǎng)基,用PBS洗細(xì)胞一次。
3. 加入適當(dāng)體積稀釋好的O06探針。加入的體積以能充分蓋住細(xì)胞為宜,通常對(duì)于六孔板的一個(gè)孔加入稀釋好的O06探針不少于1毫升。
4. 在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)避光孵育20分鐘。
5. 用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次,以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的O06探針。
收集后標(biāo)記:懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞消化處理
1. 按照1:1000用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋O06探針。
2. 離心移除培養(yǎng)基,用PBS洗細(xì)胞一次。
3. 細(xì)胞收集后懸浮于稀釋好的O06探針中,細(xì)胞濃度為1*106-2*107/毫升,37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)避光孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下,使探針和細(xì)胞充分接觸。
4. 用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞三次,以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的O06探針。
5. 用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
二、 檢測(cè):
對(duì)于原位標(biāo)記探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
熒光強(qiáng)度強(qiáng),活性氧強(qiáng)度高。
對(duì)于收集細(xì)胞后標(biāo)記探針的樣品可以用熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞儀檢測(cè),用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。
使用488 nm激發(fā)波長(zhǎng),525 nm發(fā)射波長(zhǎng),實(shí)時(shí)或逐時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)刺激前后熒光的強(qiáng)弱。O06探針的熒光光譜和FITC非常相似,可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測(cè)。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)