詳細(xì)介紹
黃曲霉毒素B1檢測(cè)卡原理:
樣本溶液滴入檢測(cè)卡的加樣孔后,樣本溶液中的黃曲霉毒素B1與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的黃曲霉毒素B1含量大于檢測(cè)*檢測(cè)線不顯色,結(jié)果為陽(yáng)性;當(dāng)樣本溶液中黃曲霉毒素B1含量小于檢測(cè)*檢測(cè)線顯紫紅色,結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑卡靈敏度:2ppb(ng/ml)
對(duì)樣本的最終檢測(cè)限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測(cè)下限:
谷物、飼料、糧油……………10ppb
谷物、飼料(須吹干)………5ppb
3 試劑盒組成
檢測(cè)卡…………………………50個(gè)/盒
說(shuō)明書(shū)…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:?jiǎn)蔚?0µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 試劑:甲醇,正己烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:樣本提取液
70%甲醇,即V甲醇:V去離子水=7:3。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 谷物、飼料
1)稱取2g粉碎樣本于離心管中,再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測(cè)下限 | 10ppb | 20ppb | 50ppb | 100ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 10ml | 20ml |
振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。
2)取0.1ml上清,加入0.4ml去離子水,混勻備用。
5.3.2谷物、飼料(須吹干)
若要求檢測(cè)下限為5ppb時(shí),可按如下操作:
1)稱取2g粉碎樣本于離心管中,加入4ml樣本提取液,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘;
2)取1ml上層液體在50-60℃條件下用氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?/span>
3)先加入0.25ml70%甲醇溶解剩下的殘留物,劇烈震蕩2分鐘;再加入1ml去離子水,混勻備用。(注意:這一步甲醇與水的加液順序不能顛倒)
稀釋倍數(shù):2.5倍 檢測(cè)下限:5ppb
5.3.3糧油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)稱取2g樣本于離心管中,再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測(cè)下限 | 10ppb | 20ppb | 40ppb | 100ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
然后加入8ml正己烷,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。
2)去除上層液體,取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水,混勻備用。
6 實(shí)驗(yàn)步驟
6.1 撕開(kāi)檢測(cè)卡鋁箔包裝袋,取出檢測(cè)卡,放于平整、潔凈的臺(tái)面上。
6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。
7 結(jié)果判斷
陰性:在檢測(cè)窗內(nèi),檢測(cè)線(T)及對(duì)照線(C)同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線。
陽(yáng)性:在檢測(cè)窗內(nèi),只有對(duì)照線(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
失效:在檢測(cè)窗內(nèi),對(duì)照線(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
8 注意事項(xiàng)
8.1 過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開(kāi),打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測(cè)卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣本溶液需清亮、無(wú)混濁顆粒、無(wú)細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
9 貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。