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          實(shí)驗(yàn)室用水的經(jīng)典問題!

          閱讀:2493        發(fā)布時(shí)間:2020-11-6

          相信實(shí)驗(yàn)室大部分實(shí)驗(yàn)都離不開水,所以對實(shí)驗(yàn)室用水肯定會有各種問題存在,小析姐就整理 了提問率比較多的問題?

          相信總有那么一個(gè)是你現(xiàn)在或曾經(jīng)也想問的。

          一、為什么超純水的電阻率為 18.2 MΩ·cm? 電導(dǎo)率的計(jì)算公式如下:X 是電導(dǎo)率, F 是法拉第常數(shù), Ci是某種離子濃度,Zi 是離子的電荷數(shù) ,Ui指離子遷移率。X = FΣ CiZiUi

          理論上,*不含離子的超純水在25℃時(shí)電導(dǎo)率為0.055μS/cm。電阻率是電導(dǎo)率的倒 數(shù)。 那么R=1/X,1/0.055=18.1818,約為18.2 MΩ·cm

           

           二、評價(jià)水質(zhì)的常用指標(biāo)

          1、電阻率(electrical resistivity) 衡量實(shí)驗(yàn)室用水導(dǎo)電性能的指標(biāo),單位為MΩ-cm,隨著水內(nèi)無機(jī)離子的減少電阻加大則數(shù)值 逐漸變大,實(shí)驗(yàn)室超純水的標(biāo)準(zhǔn):電阻率為18.2MΩ-cm。

          2、總有機(jī)碳(Total Organic Carbon ,TOC) 水中碳的的濃度,反映水中氧化的有機(jī)化合物的含量,單位為ppm 或 ppb。 )

           革蘭氏陰性細(xì)菌的脂多糖細(xì)胞壁碎片,又稱之為“熱原”,單位cuf/ml。

           三、實(shí)驗(yàn)室常見的水的種類

          1、蒸餾水: 實(shí)驗(yàn)室常用的一種純水,雖設(shè)備便宜,但極其耗能和費(fèi)水且速度慢,應(yīng)用會逐漸減少。蒸餾 水能去除自來水內(nèi)大部分的污染物,但揮發(fā)性的雜質(zhì)無法去除,如二氧化 碳、氨、二氧化硅 以及一些有機(jī)物。新鮮的蒸餾水是無菌的,但儲存后細(xì)菌易繁殖;此外,儲存的容器也很講 究,若是非惰性的物質(zhì),離子和容器的塑形物質(zhì)會析出造成二次污染。

          2、去離子水: 應(yīng)用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子,但水中仍然存在可溶性的有機(jī)物,可以污染離 子交換柱從而降低其功效,去離子水存放后也容易引起細(xì)菌的繁殖。

          3、反滲水: 反滲水克服了蒸餾水和去離子水的許多缺點(diǎn),利用反滲透技術(shù)可以有效的去除水中的溶解鹽、 膠體,細(xì)菌、病毒、細(xì)菌內(nèi)毒素和大部分有機(jī)物等雜質(zhì),但不同廠家反滲水質(zhì)量差別很大。

          4、超純水: 其標(biāo)準(zhǔn)是水電阻率為18.2MΩ-cm。但超純水在TOC、細(xì)菌、內(nèi)毒素等指標(biāo)方面并不相同,要 根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求來確定,如細(xì)胞培養(yǎng)則對細(xì)菌和內(nèi)毒素有要求,而HPLC則要求TOC低。

          我們從新頒布實(shí)施的乳制品食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)可以看出:隨著精密分析儀器的運(yùn)用和檢驗(yàn)檢測 技術(shù)的提高,實(shí)驗(yàn)用水已成為影響檢驗(yàn)檢測靈敏度、準(zhǔn)確度和可靠性的重要因素。

          因此,為避免實(shí)驗(yàn)用水參差不齊對檢驗(yàn)帶來的不良后果,新食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)舍棄了“蒸餾 水”、“去離子水”和“去離子蒸餾水”等經(jīng)常出現(xiàn)在舊國標(biāo)中模糊的實(shí)驗(yàn)用水要求,果斷啟 用對水質(zhì)有具體指標(biāo)和參數(shù)要求的新規(guī)定,主要是引用《GB/T6682-2008 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī) 格和試驗(yàn)方法》對各級水的規(guī)定。

          按照GB6682-2008的標(biāo)準(zhǔn),純水水質(zhì)分為哪幾類?

          根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 6682—2008規(guī)定實(shí)驗(yàn)室用水分為三個(gè)等級:一級水、二級水和三級水。

          一級水可用二級水經(jīng)過石英設(shè)備蒸餾或超純水制備裝置制取后,再經(jīng)0.2µm微孔濾膜過濾。

          二級水可用多次蒸餾或超純水制備裝置制取。

          三級水可用蒸餾或離子交換等方法制取。

          四、不同級別純水的應(yīng)用領(lǐng)域

           以色譜方法實(shí)驗(yàn)用水為例,乳制品食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)中涉及HPLC或GC的方法都要求使用 GB/T6682規(guī)定的一級水,由于離子水、蒸餾水及瓶裝水(如哇哈哈、樂百氏等)不符合

          GB/T6682規(guī)定一級水的指標(biāo)要求,根據(jù)國標(biāo)這類水不能用于乳制品相關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)!

          五、為什么純水的儲存和分配會影響其水質(zhì)

          純水/超純水隨著時(shí)間的延長而水質(zhì)下降。導(dǎo)致水質(zhì)劣化的原因來自以下幾個(gè)方面:

          儲存器:由于純水中溶解的離子濃度很低甚至沒有,這樣子純水極易從外界環(huán)境中吸收離子污 染物。 低級塑料和玻璃制造的儲水器會溶出離子和有機(jī)物,增加水的電導(dǎo)率,劣化水質(zhì)。因 而推薦使用低溶出的高級聚乙烯儲水器。

          通氣口:多數(shù)的儲水器都有一個(gè)排氣口用于取水期間空氣的流通。通氣口吸入外界空氣的同時(shí) 帶入實(shí)驗(yàn)室空氣中的CO2,細(xì)菌,顆粒和揮發(fā)性有機(jī)物。 這些都將污染儲存在水箱中的純水。 因而通氣口應(yīng)配置空氣過濾器以阻止有機(jī)物,細(xì)菌和CO2進(jìn)入水箱。

          設(shè)計(jì): 在清洗過程中,無法將平底水箱的水排干。這些未能排干的水是細(xì)菌生長的一個(gè)根源。 因此我們推薦使用錐形底的水箱以排干所有的水。水箱應(yīng)采用吹塑成型的方式制作以防止凹凸 不平的表面為細(xì)菌提供生長繁殖的場所。

          分配: 好的分配泵應(yīng)該在連續(xù)工作10個(gè)小時(shí)的情況下也不會造成溫度的升高,溫度的升高利于 細(xì)菌的生長

           水箱所使用的PE材料會不會溶出有機(jī)物,

          六、為什么我們不能離線方式檢測超純水的電阻率?

          電導(dǎo)率的計(jì)算公式如下:X 是電導(dǎo)率, F 是法拉第常數(shù), Ci 是某種離子濃度, Zi 是離子的電荷 數(shù) ,Ui 指離子的遷移能力。

          X = FΣ Ci Zi Ui 理論上,*不含離子的超純水在 25℃ 時(shí)電導(dǎo)率為 0.055 μS/cm 。 電阻率是電導(dǎo)率的倒 數(shù),為 18.2 MΩ·cm。

          當(dāng)超純水暴露在外界環(huán)境中時(shí),會被外界環(huán)境污染。實(shí)驗(yàn)室里含有大量空氣,空氣溶于水變成 離子存在于超純水中。 另外,測量電導(dǎo)率所用到的儀器(燒杯,電阻率儀/探針)也會帶入離 子污染物。正如電導(dǎo)率的計(jì)算公式中所示,任何離子的增加都會影響電導(dǎo)率值,因?yàn)殡妼?dǎo)率與 離子的種類和其所帶電荷成正比。所以不能在離線情況下準(zhǔn)確測量超純水的電阻率/電導(dǎo)率, 必須用在線的方式進(jìn)行檢測。

          七、EDI 是如何去除有機(jī)物的? EDI 只能去除帶電有機(jī)分子。 由于電極間存在電壓,微電離的有機(jī)分子(如乙酸/草酸/腐殖酸) 向陽極移動(dòng)。

          例如:CH3COOH--- CH3COO- + H+ CH3COO-帶負(fù)電荷,向陽極移動(dòng)。陰、陽離子通透膜使陰、陽離子聚集在濃縮通道。 流經(jīng) EDI的電極通道和濃縮通道的水都為棄水。

          八、細(xì)菌對HPLC相關(guān)應(yīng)用有什么影響?

          用含有細(xì)菌的水制備HPLC系統(tǒng)的流動(dòng)相,會產(chǎn)生很多問題:

          被色譜介質(zhì)截留下來的細(xì)菌會增殖,造成阻塞。細(xì)菌會附著在色譜微球表面,覆蓋住活性位 點(diǎn),會造成洗脫時(shí)間發(fā)生變動(dòng)。截流下來的細(xì)菌代謝產(chǎn)生的有毒副產(chǎn)品會在分析過程中產(chǎn)生假 峰,帶來錯(cuò)誤的分析結(jié)果。

          九、重金屬對細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響

          很多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明了重金屬和聚合芳烴(PAH)的細(xì)胞毒素影響存在于空氣,水和土壤中的 環(huán)境化學(xué)污染物在很多方面影響著人類。汽車廢氣的燃燒所才產(chǎn)生的PAHs,和香煙影響內(nèi)分 泌系統(tǒng)。很多重金屬會導(dǎo)致腎衰竭,而汞能移動(dòng)到大腦導(dǎo)致神經(jīng)衰弱。

          在測試的 12 種重金屬(Al,Ge,Ca,Cu,Pb,Mg,Mn,鎳,錫,Zn,硒酸鹽和ya硒酸鹽)中有四種(Ca,Cu, 鎳和Zn)顯示了細(xì)胞毒性。即使只有 1.5M 的重金屬(Cd, Cu, Ni 和Zn),也能發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞死亡。 因此,推薦使用無離子污染和無有機(jī)污染的水來做細(xì)胞培養(yǎng)。

          十、使水中的TOC含量上升? 有許多材料被用來制造水箱。對不同級別的高密度聚乙烯,聚丙烯進(jìn)行試驗(yàn),測試這些材料的 溶出。 將5mg不同的原材料放置在100mL的水中(電阻率18.2MΩ.cm, TOC< 10ppb),="">在有機(jī)物(以TOC ppb計(jì))方面, 3天以來聚乙烯溶出的TOC含量在減少。這表明只要仔細(xì) 清洗,就可能使PE水箱的有機(jī)物溶出達(dá)到少。

          與其他材料,如FEP (氟化乙丙烯),PA ( 聚酰胺 ) , PU (聚亞安酯) 相比,PE材料的離子和有機(jī) 物溶出少。

          在日常實(shí)驗(yàn)中,你有什么對實(shí)驗(yàn)室用水的問題呢?給小析姐留言,我們一起探討一起進(jìn)步吧!

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