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發(fā)酵罐的操作使用優(yōu)勢及機械方面使用操作
發(fā)酵罐也是應(yīng)用廣泛的生物反應(yīng)設(shè)備。這類反應(yīng)器具有結(jié)構(gòu)簡單、不易染菌、溶氧效率高、能耗低等優(yōu)點。氣升式反應(yīng)器有多種類型，常見的有氣升環(huán)流式、鼓泡式、空氣噴射式等，生物工業(yè)已經(jīng)大量應(yīng)用的氣升式發(fā)酵罐有氣升內(nèi)環(huán)流發(fā)酵罐、氣液雙噴射氣升環(huán)流發(fā)酵罐、設(shè)有多層分布板的塔式氣升發(fā)酵罐。
而發(fā)酵罐則是原始的通氣發(fā)酵罐，當(dāng)然鼓泡式反應(yīng)器內(nèi)沒有設(shè)置導(dǎo)流筒，故未控制液體的主體定向流動?，F(xiàn)以氣升環(huán)流式反應(yīng)器為例說明其工作原理。前面已經(jīng)簡單提到氣升環(huán)式反應(yīng)器的特點，由于氣升環(huán)流反應(yīng)器內(nèi)沒有攪拌器，并且有定向循環(huán)流動，故具有多個優(yōu)點，下面具體說明。
1、反應(yīng)溶液分布均勻：氣液固三相的均勻混合與溶液成分的混合分散良好是生物反應(yīng)器的普遍要求，因其流動、混合與停留時間分布均受到影響。對許多間歇或連續(xù)加料的通氣發(fā)酵，基質(zhì)和溶氧盡可能均勻分散，以保證其基質(zhì)在發(fā)酵罐內(nèi)各處的濃度都落在0.1％～1％范圍內(nèi)，溶解氧為10％一30％。這對需氧生物細(xì)胞的生長和產(chǎn)物生成有利。此外，還需避免發(fā)酵罐液面生成穩(wěn)定的泡沫層，以免生物細(xì)胞積聚于上而受損害甚至死亡。還有培養(yǎng)基成分尤其是有淀粉類易沉降的顆粒物料，更應(yīng)能懸浮分散。氣升環(huán)流反應(yīng)器能很好地滿足這些要求。
2、較高的溶氧速率和溶氧效率：氣升式反應(yīng)器有較高的氣含率和比氣液接觸介面，因而有高傳質(zhì)速率和溶氧效率，體積溶氧效率通常比機械攪拌罐高，kLd可達2000h，且溶氧功耗相對低。
3、剪切力小，對生物細(xì)胞損傷?。河捎跉馍椒磻?yīng)器沒有機械攪拌葉輪，故對細(xì)胞的剪切損傷可減至低，尤其適合植物細(xì)胞及組織的培養(yǎng)。
4、傳熱良好：好氣發(fā)酵均產(chǎn)生大量的發(fā)酵熱，如酵母培養(yǎng)旺盛期發(fā)酵熱高達3.0～4.0×105kJ／(m.h)，而傳熱溫差則只有幾度(℃)，尤其夏季，若使用非冷凍水，則只有3-10℃左右，故需很大的換熱面積與傳熱系數(shù)。發(fā)酵罐因液體綜合循環(huán)速率高，同時便于在外循環(huán)管路上加裝換熱器，以保證除去發(fā)酵熱以控制適宜的發(fā)酵溫度。
滅菌時至少要求兩人在場，一人負(fù)責(zé)操作各種閥門，另一人負(fù)責(zé)觀察報告各項參數(shù)。確認(rèn)各閥門處于關(guān)閉狀態(tài)后，打開蒸汽發(fā)生器進水閥，啟動蒸氣發(fā)生器，蒸氣發(fā)生器開始自動進水，此時應(yīng)打開蒸氣發(fā)生器下部的排水閥，盡量放去水銹后關(guān)閉排水閥。注意觀察蒸汽發(fā)生器內(nèi)水量液位，防止事故。此時*打開夾套出氣閥閥門，緩慢打開蒸汽發(fā)生器總閥門，緩慢部分打開夾套進氣閥，開始對夾套通入水蒸氣。開始時可能蒸汽壓力不穩(wěn)，壓力表指針劇烈擺動，可以適當(dāng)關(guān)小夾套進氣閥，然后依次打開取樣閥出蒸汽閥，取樣閥進蒸汽閥，底閥出蒸汽閥，底閥進蒸汽閥，對取樣閥和底閥滅菌，同時排盡壓力不穩(wěn)的水蒸氣。水蒸氣壓力不劇烈變化時再依次關(guān)閉、底閥出氣閥。罐內(nèi)溫度逐漸上升，至所設(shè)置90°溫度時，攪拌電機停止轉(zhuǎn)動，此時打開罐體總進氣閥，打開罐體出氣管閥，依次打開以下閥門：打開出氣調(diào)節(jié)閥，緩慢打開罐體進蒸汽閥對罐內(nèi)通入蒸汽，
空氣濾器表壓開始上升，超過0.1MP時打開冷凝水閥門疏水，繼續(xù)開大罐體進蒸汽閥，除盡罐內(nèi)空氣后，罐內(nèi)壓緩慢上升，調(diào)整出氣調(diào)節(jié)閥，使之達到滅菌所要求溫度壓力，達到滅菌溫度時計時開始。調(diào)整夾套進氣閥、罐體進蒸汽閥和出氣調(diào)節(jié)閥，使溫度、罐壓保持所設(shè)溫度。滅菌時間到后，依次關(guān)閉已開的各進汽閥門，關(guān)閉蒸汽總閥門，*放開罐內(nèi)尾氣排氣閥放掉罐內(nèi)壓力，關(guān)閉蒸汽發(fā)生器電源。打開空氣壓縮機，等罐壓降至0.05MP時，緩慢打開進氣調(diào)節(jié)閥，維持罐內(nèi)正壓。滅菌過程中，操作員應(yīng)穿長衣長褲，帶防護手套，防止?fàn)C傷。滅菌過程中如果蒸汽發(fā)生器自動進水，蒸汽總壓將迅速下降，必要時可以適當(dāng)開大蒸汽總閥門，保持壓力，但要小心觀察壓力變化。對罐內(nèi)通蒸汽時，滅菌后罐壓下降較快，注意通無菌空氣時機。盡量不要使空氣壓縮機和蒸汽發(fā)生器同時工作。滅菌過程中空氣濾器壓力不應(yīng)超過0.2MP。冷凝水的大小將影響罐內(nèi)液體滅菌后濃度，要考慮蒸汽冷凝水增加量。
控制進氣閥排氣閥的大小可以調(diào)整通氣量和罐壓，控制攪拌轉(zhuǎn)數(shù)使發(fā)酵溶氧滿足工藝要求。發(fā)酵時打開罐體進水總閥，打開夾套出水閥和夾套進水閥，此時系統(tǒng)自動通過控制夾套水溫控制發(fā)酵溫度。由于罐內(nèi)正壓，接菌時關(guān)小進氣閥，適當(dāng)降低罐壓至0.01—0.02MP，用火焰圈保護將接種口快速打開（防止氣流將火焰熄滅），接種后快速關(guān)閉接種口。將補料系統(tǒng)的各個瓶及附屬膠管滅菌后聯(lián)入主機（注意方向），在火焰圈保護下刺破硅膠墊，安裝好補料系統(tǒng)。此時工作站上應(yīng)顯示有系統(tǒng)的各個參數(shù)實時監(jiān)控。注意做好參數(shù)記錄工作。
發(fā)酵進行到后期時，可能會有菌體堵塞出氣管，現(xiàn)象為通氣量下降，罐壓略有增高。此時人為左右旋轉(zhuǎn)出氣閥，可以使堵塞緩解