在樣本DNA提取的實(shí)驗(yàn)分析中,樣本預(yù)處理起著重要的作用。因此,在使用冷凍研磨儀研磨樣品前,應(yīng)做好這些準(zhǔn)備工作。研磨粉碎2x96個(gè)樣品僅需1-3分鐘。在樣品破碎過程中,通過磨槽沿水平方向的圓弧徑向擺動(dòng),在高頻振蕩的作用下,磨槽內(nèi)的磨球在高速?zèng)_擊下將樣品破碎,球之間的摩擦沖擊可以有效地導(dǎo)致細(xì)胞破裂。通過研磨設(shè)備的垂直振蕩和振蕩系統(tǒng)的高頻往復(fù)運(yùn)動(dòng),使研磨管中的冷凍樣品與研磨珠相互碰撞產(chǎn)生摩擦。在研磨剪切力和沖擊力的幫助下,樣品組織可以*破碎。生物樣品的研磨、粉碎、混合和細(xì)胞破碎可以在幾秒到幾分鐘內(nèi)完成,達(dá)到理想的研磨效果。
冷凍研磨儀對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理前,應(yīng)將緩沖液進(jìn)行低溫預(yù)冷,準(zhǔn)備若干個(gè)冰塊備用,鑷子、剪刀等研磨工具用高濃度殺菌劑消毒。如果在操作過程中需要從樣本中提取RNA等成分,鑷子、剪刀等物品需要再次用酒精消毒,盡可能對(duì)RNase進(jìn)行消毒。另外,將準(zhǔn)備好的離心管置于冰上進(jìn)行低溫預(yù)冷,加入適量的PBS緩沖液。然后,從-80℃冰箱中取出磨碎的組織樣品,置于冰上,用消毒過的鑷子和剪刀將樣品切成小塊,然后放入相應(yīng)的離心管中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
將離心管放入研磨設(shè)備的適配器,啟動(dòng)研磨設(shè)備,設(shè)置樣品研磨參數(shù),啟動(dòng)儀器程序運(yùn)行,研磨樣品。研磨儀停止運(yùn)轉(zhuǎn)后,取出研磨樣品,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析應(yīng)用。使用冷凍研磨儀進(jìn)行樣品研磨主要是為了高效、快速地完成研磨工作,避免樣品之間的交叉感染,減少對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作和分析結(jié)果的影響。