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1032678-42-4,Cy5 NHS,小鼠活體應(yīng)該能標記染料
閱讀：1171 發(fā)布時間：2018-7-251032678-42-4,Cy5 NHS,小鼠活體應(yīng)該能標記染料
CY5 NHS ester是用于標記多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基團的活性染料。在標記反應(yīng)中該染料需要少量的有機共溶劑（如DMF，DMSO）。對于可溶性蛋白、各種各樣的多肽和寡核苷酸而言，這種染料是非常理想而且成本低廉的。該染料在有機溶劑對小分子物質(zhì)的標記也是非常有效的。對于更多的精細目標物，如易降解蛋白，如果DMF或DMSO會對其有影響，可以考慮water-soluble Cy5 NHS ester（水溶性Cy5 NHS ester染料），因為它們不需要有機溶劑助溶，而且具有和熒光染料類似的性質(zhì)。
在過去的幾年里，CY5熒光團已經(jīng)成為生命科學(xué)研究和診斷領(lǐng)域非常流行的分子標記物。這些熒光素的發(fā)射光為紅光，在這個范圍大多數(shù)CCD檢測器具有大檢測靈敏度，而且是生物物質(zhì)低背景區(qū)。染料的顏色是非常強烈的，因此在凝膠電泳中低至1nmol的量都能被肉眼觀測到。CY5 NHS ester是用于標記多肽、蛋白和寡核苷酸的氨基基團的活性染料。在標記反應(yīng)中該染料需要少量的有機共溶劑（如DMF，DMSO）（請參照我們的推薦手冊以獲得更多幫助信息）。對于可溶性蛋白、各種各樣的多肽和寡核苷酸而言，這種染料是非常理想而且成本低廉的。該染料在有機溶劑對小分子物質(zhì)的標記也是非常有效的。對于更多的精細目標物，如易降解蛋白，如果DMF或DMSO會對其有影響，可以考慮water-soluble Cy5 NHS ester（水溶性Cy5 NHS ester染料），因為它們不需要有機溶劑助溶，而且具有和熒光染料類似的性質(zhì)。
CY5熒光團可以與很多的儀器如熒光顯微鏡、成像儀、掃描儀、熒光分析儀等相兼容。許多的CY5衍生物——CY5 NHS ester可以替代Alexa Fluor 647和 DyLight 649等活化酯（activated esters）。
一般特性
外觀: | dark blue powder |
分子量: | 616.19 |
分子式: | C36H42ClN3O4 |
CAS number: | 1032678-42-4, 350686-88-3 |
溶解性: | good in polar (DMSO, DMF) and chlorinated (DCM, chlroform) organic solvents, low solubility in water |
質(zhì)量控制: | NMR 1H (95%) and 13C, TLC, functional testing |
儲存條件: | Storage: 24 months after receival at -20°C in the dark. Transportation: at room temperature for up to 3 weeks. Avoid prolonged exposure to light. Desiccate. |
光譜特性
大激發(fā)波長, nm: | 646 |
在大激發(fā)波長下的消光系數(shù), Lmol-1cm-1: | 250000 |
大發(fā)生波長, nm: | 662 |
熒光量子產(chǎn)率: | 0.2 |
Cyanine3/5/7-藥物分子或小分子多肽用于小鼠活體成像實驗
實驗步驟如下：
SPF級 BALB/C裸鼠，6～8 周齡, 18～20克, 實驗前24 h 自由進食、飲水。
于實驗裸鼠腹腔內(nèi)注射2%戊ba bi妥鈉300μL(215 mg/ kg)麻醉動物。將裸鼠俯臥位平放于小動物多光譜活體成像系統(tǒng)的記錄暗箱中。
實驗時將Cy7 或Cy7 標記的生物分子或藥物DMSO 稀釋后,于裸鼠尾靜脈注射200μL( 0.5 mg/g) [用量和時間需要客戶根據(jù)自己的儀器和藥物試劑等條件優(yōu)化] ,每5min 記錄1張動物在體內(nèi)發(fā)射熒光的成像圖片,分析熒光藥物的分布情況。對照鼠不注射藥物，進行同時記錄。記錄結(jié)束后迅速解剖裸鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器，進行成像。
Cy7 檢測時激發(fā)波長700～770 nm 帶通 ,發(fā)射波長790 nm 長通。液晶可調(diào)諧濾光片掃描范圍 780～950 nm ,掃描步進10 nm。曝光時間為500 ms。
不同的藥物代謝時間不一樣，注射入裸鼠體內(nèi)，熒光立即分布全身，然后逐步向膀胱聚集，呈現(xiàn)顯著的腎排泄的特點一般4~6 小時，快得只有30 分鐘;如果是骨骼等部位靶點的Cy7 標記藥物，有客戶反映一周后活體成像系統(tǒng)仍能檢測到熒光成像。
器官切片觀察：將解剖的器官迅速放置于4%多聚甲醛固定4 小時以上，0%，20%，30%PBS 蔗糖依次沉底，20μm 切片，多聚賴氨酸洗過的載玻片貼片，晾干，DAPI 染色。共聚焦顯微鏡觀察，激光器為氦氖 633 nm。
其余N-羥基琥珀酰亞胺脂Dye NHS esters產(chǎn)品
Pyrenebutyric acid NHS ester
ROX NHS ester, pure 6- isomer
BDP FL NHS ester
FAM NHS ester
Cyanine3 NHS ester
Cyanine3.5 NHS ester
Cyanine5 NHS ester
Cyanine5.5 NHS ester
Cyanine7 NHS ester
Cyanine7.5 NHS ester
Sulfo-Cyanine3 NHS ester
Sulfo-Cyanine5 NHS ester
sulfo-Cyanine5 bis-NHS ester
Sulfo-Cyanine7 NHS ester
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