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          技術(shù)文章

          動物腦損傷模型如何制作?腦損傷模型如何準確評估?

          閱讀:1782          發(fā)布時間:2020-6-28

          VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)是一種計算機輔助的、自動、定量分析步態(tài)系統(tǒng)。能快速的、客觀的定量分析大量動靜態(tài)步態(tài)參數(shù),尤其是對動態(tài)參數(shù)的分析是優(yōu)于其他分析方法。目前該系統(tǒng)已經(jīng)用于脊髓損傷、神經(jīng)痛、外周神經(jīng)損傷、關(guān)節(jié)炎、帕金森病、缺血性腦卒中、腦損傷等疾病及神經(jīng)功能、神經(jīng)再生領域的研究。其中創(chuàng)傷性顱腦損傷(TBI)是死亡率和致殘率z高的疾病之一,TBI后生存患者常殘留運動、認知等神經(jīng)功能障礙干細胞因其具有自我更新及多向分化能力,在治療腦損傷中具有可行性和有效性。
          首先利用上海欣軟電動顱腦脊髓損傷撞擊儀制作創(chuàng)傷性顱腦損傷(TBI)模型,然后采用VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)進行大鼠的步態(tài)指標測定。


          步態(tài)測試過程中,每只大鼠接受至少3次評估,每次必須連續(xù)的走完設定好的長度范圍玻璃平板,整個實驗過程在暗室環(huán)境中完成。VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)在識別并標記出每一個腳印后,將自動產(chǎn)生一系列步態(tài)參數(shù),包括:每個爪子各自的相對空間關(guān)系、爪子之間的相對空間關(guān)系、四肢間的協(xié)調(diào)性、時間參數(shù)等。VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)評分通過對各種參數(shù)的采集,則可清楚、客觀的反映出大鼠四肢爪子每一只的具體情況,尤其對反應大鼠運動的協(xié)調(diào)性具有明顯優(yōu)勢。我們從步態(tài)分析的各個參數(shù)來看,腦損傷后大鼠的運動功能明顯出現(xiàn)功能障礙,干細胞移植治療后則運動功能出現(xiàn)明顯的好轉(zhuǎn)。

          首先,從時間、空間參數(shù)上看,TBI后的大鼠相對于正常組,其每一只爪子的壓力、長度、寬度、面積、步幅都發(fā)生了減少的變化(這可能與感覺運動皮層受損有關(guān)),而四肢之間具有一致性,并沒有出現(xiàn)某一只爪子相對于對側(cè)爪子的大幅度變化情況。
          通過VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)所檢測到四肢的各項參數(shù)恢復情況又有所不同。如在平均壓力和爪印寬度中,前肢的恢復情況較后肢好;大接觸面積、爪印面積、爪印長度則四肢都有較明顯的恢復,說明大鼠在治療后,四肢的力量有所增加,導致其爪子的壓力、接觸面積增大。

          此外,VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)可以捕捉到各組動物在接觸時間、提爪時間、步速參數(shù)中的數(shù)據(jù),且可以通過這些數(shù)據(jù)來表明,干細胞移植治療后的大鼠四肢恢復明顯接近正常水平,步行過程中停留的時間明顯減少,提示其在運動過程中身體的穩(wěn)定、平衡性有明顯的恢復,同時步行的速度也加快。

          其次,VisuGait小動物步態(tài)分析系統(tǒng)通過測量步態(tài)模式、正常步態(tài)指數(shù)、 步幅及兩前爪/后爪間距離等參數(shù)來反應大鼠運動的協(xié)調(diào)性,屬于精確的定量性分析。其中步態(tài)模式和正常步態(tài)指數(shù)這兩個參數(shù)能較好地反應出大鼠的運動協(xié)調(diào)性,曾較早用于脊髓損傷和帕金森病導致的肢體協(xié)調(diào)性下降評估。腦損傷后的大鼠,在行走過程中的步伐順序發(fā)生了明顯變化,且各種平常較少見模式的出現(xiàn)比例也增多;而在干細胞移植治療組,這種趨勢相對于損傷組則有所減少。正常步態(tài)指數(shù)-正常步態(tài)數(shù)量占總步態(tài)數(shù)量的百分比,在治療后也呈顯著提高。大鼠腦損傷后步幅明顯下降,提示TBI后總體協(xié)調(diào)性下降、導致步行速度減慢;而UC-MSCs移植治療后使其步行速度明顯提高。行走支撐模式參數(shù)結(jié)果表明,大鼠在TBI后,其行走過程靠四肢爪子同時支撐平衡身體的比例明顯增高,分析可能與大鼠在腦損傷后整個身體不平 衡有關(guān)。(正常情況下的大鼠用三只爪子就可很好地平衡身體)。

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