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          技術(shù)文章

          動物行為實驗專題:高架零迷宮(ZERO MAZE)

          閱讀:1365          發(fā)布時間:2021-10-26

                高架零迷宮(EZM)是高架十字迷宮(EPM)的改良版本,結(jié)合了經(jīng)典和新的行為學測量方法。O迷宮作為一種焦慮行為的檢測方法,已經(jīng)越來越受歡迎。它利用了嚙齒動物與生俱來的對黑暗封閉空間的偏好,而不是對開放空間的偏好。與 EPM 不同的是,EZM 將實驗動物置于一個連續(xù)的回路中,該回路具有交替的圍墻和非圍墻區(qū)域。

                 迷宮是根據(jù)Montgomery (1955)實驗的原理開發(fā)的,該實驗使用高架Y迷宮,其中一個選擇臂封閉以模擬安全空間,另一個選擇臂未封閉。Shepherd 及其同事在 1994 年發(fā)表的論文中開發(fā)了高架零迷宮 (Shepherd 1992, Shepherd et al., 1993 ) 并在藥理學上驗證了小鼠的焦慮樣行為。作為高架十字迷宮的更好替代品,O迷宮引起了越來越多的興趣。

          高架零迷宮由一條高出地面的圓形軌道組成,分為四個象限。小巷的交替部分(象限)被暗墻包圍,而其余部分保持開放。EZM消除了EPM的選擇點,從而消除了與中央?yún)^(qū)域相關(guān)的模糊性。

          儀器設(shè)備

                 零迷宮由直徑為 40 至 110 厘米、寬度為 50 至 10 厘米的圓形小巷組成。小巷分為四個相等的象限。每個相對的象限都用大約 30 厘米高的深色墻壁圍起來,以創(chuàng)造一個封閉的空間。其余的兩個象限與大約 5 毫米的邊緣接壤,以防止受試者從軌道上掉下來,這些象限用作開放的焦慮空間。儀器被抬高到地板上方至少 70 厘米的高度。

                為避免陰影并確保所有象限的照明均等,應(yīng)從上方點亮 EZM。選擇適當?shù)恼彰鬟€能確保動物看到食物獎勵或其他提示(如果使用)。安裝在迷宮上方的視頻跟蹤軟件,例如VisuTrack,可以幫助實時評分、跟蹤和記錄對象及其在迷宮內(nèi)的運動。在每次試驗之前和之后必須*清潔設(shè)備,以限制來自先前試驗的任何殘留刺激的影響。

          訓(xùn)練方法


                高架零迷宮的連續(xù)小巷設(shè)計比高架十字迷宮更敏感,因此用于評估焦慮和焦慮樣行為更合理。與 EPM 一樣,EZM 也利用實驗動物對開放空間的偏好作為評估治療組或疾病組與對照組相比的表現(xiàn)的一種方式。

                嚙齒動物天生喜歡封閉或封閉的空間,這讓它們感到安全。因此,他們傾向于避免探索暴露的小巷,就像探索封閉的小巷一樣。接受抗焦慮藥物治療的動物表現(xiàn)出減少的焦慮樣行為,更可能探索迷宮的暴露區(qū)域。另一方面,由于焦慮樣感覺增強,接受抗焦慮藥物治療的動物傾向于在開放空間花費較少時間,而在探索封閉區(qū)域花費較多時間。動物在這兩個區(qū)域花費的時間量提供了關(guān)于受試動物焦慮狀態(tài)的信息。

          迷宮本身不需要預(yù)訓(xùn)練,因為該任務(wù)旨在測試受試動物對陌生迷宮的反應(yīng)。每次試驗前,必須用乙醇溶液*清潔儀器,以避免殘留刺激的影響(如果有的話)。

          零迷宮中焦慮樣行為的評估

          實驗動物在測試前至少 1 小時被帶入測試區(qū)域。在測試期間,確保所有照明水平一致且不抑制探索行為是很重要的。

          視頻記錄開始(如果使用),測試動物被放置在封閉小巷的中心,可以自由探索迷宮(也有部分文獻顯示將測試動物放置在開放區(qū)域的中心)。每次測試至少持續(xù)5分鐘,之后將測試動物小心地從迷宮中取出并放入其鼠籠中。錄制也會在5分鐘結(jié)束時停止。對每只測試動物重復(fù)試驗約3天。

          數(shù)據(jù)分析



          與 Elevated Plus Maze 類似,在 Elevated Zero Maze 任務(wù)期間測量的變量包括:

          • 在開放區(qū)域花費的時間百分比

          • 在圍墻區(qū)域花費的時間百分比

          • 進入開放空間的延遲(潛伏期)

          • 在開放和封閉區(qū)域花費的總時間

          • 總活動距離


          其他可觀察的措施包括:

          • 通過分析從封閉區(qū)域內(nèi)嗅探的頻率和持續(xù)時間來計算風險評估行為。

          • 通過評估開放區(qū)域邊緣的頭部下垂次數(shù)來降低焦慮水平。


          優(yōu)勢與局限



                 高架零迷宮的主要優(yōu)勢在于它在測試方法和解釋方面的簡單性。EZM 克服了 EPM 由于其中央平臺而產(chǎn)生的測量模糊性。在 EPM 中反復(fù)試驗后,受試者傾向于將中央平臺視為安全空間。在 EPM 中分析嚙齒動物行為時,很難評估動物在中央平臺上花費的時間,無論是在進入手臂之前還是在手臂進入之間。EZM 消除了這個中心區(qū)域,并允許動物通過在開放區(qū)域和封閉區(qū)域之間移動來不斷探索迷宮的不同象限(Shepherd 1994)。

          與其他任務(wù)不同,重復(fù)暴露于高架零迷宮的測試動物表現(xiàn)出焦慮增加,這表明受試者的情緒反應(yīng)隨著每次暴露于迷宮任務(wù)而改變。同樣重要的是要記住,EZM 會檢查與人類焦慮情緒相比的動物情緒。然而,這個測試并不等同于人類焦慮的整個范圍。很明顯,抗焦慮藥物可以減少迷宮中動物的焦慮樣行為,但還有其他因素需要考慮,這些因素可能在解釋結(jié)果中發(fā)揮重要作用,例如動物的年齡、體重、性別、物種和品系測試。

          總結(jié)



          1、高架零迷宮是根據(jù)蒙哥馬利 (1955) 調(diào)查原理開發(fā)的高架 Plus 迷宮的改編版。

          2、EZM 由 Shepherd (1992) 設(shè)計。

          3、為了克服 EPM 中中央平臺產(chǎn)生的歧義,EZM 被設(shè)計為具有封閉和開放空間的圓形小巷。

          4、EZM 在評估焦慮樣行為時比 EPM 更敏感。

          5、接受抗焦慮藥物治療的受試者通過更多地訪問開放區(qū)域,往往表現(xiàn)出減輕的焦慮樣行為。

          6、用抗焦慮藥物治療的受試者表現(xiàn)出高度的焦慮樣行為,并且更喜歡迷宮的封閉區(qū)域。

          7、特定品系的嚙齒動物可能在迷宮中表現(xiàn)不同。

          8、對 EZM 的反復(fù)試驗往往會增加類似焦慮的行為。


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