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          馬流產(chǎn)沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

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          馬流產(chǎn)沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

          試劑盒組成及試劑配制:

          1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
          2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
          3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
          4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
          5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
          6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
          7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
          8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
          9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
          10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

          樣本處理及要求:
          1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
          4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

          操作流程:

          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

          2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

          3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

          4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

          5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

          6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

          7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

          樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本

          標記物:血清 血漿 組織勻漿等

          應(yīng)用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢

          檢測方法:夾心法

          技術(shù)要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設(shè)備齊全。

          規(guī)格:48t/96t 

          性狀:液體 

          運輸方式:快遞發(fā)貨 

          有效期:6個月品

          特點:靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產(chǎn)品。

          使用范圍:此產(chǎn)品供科研實驗使用,不得用于---。

          用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。

          注意事項:

          1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

          2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          3.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          5.底物請避光保存。

          6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

          7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

          8.本試劑不同批號組分不得混用。

          9.不能使用過期產(chǎn)品。

          10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 

          每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2。

          表 2 每個樣品測試反應(yīng)體系配制表

           

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          注:本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

           

           

           


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