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CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)說明書	CA46 (human Burkitts lymphoma cells)	5×106cells/瓶×2

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CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

HA(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MFC(小鼠胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

尿皮質(zhì)素1(UCN1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Urocortin 1 (UCN1)

CD72分子(CD72)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 72 (CD72)

小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

MFC培養(yǎng)基/MFC Medium飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

衛(wèi)矛醇半固體瓊脂/Dulcitol Semisolid Agar細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗(yàn)10克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

急性T淋巴細(xì)胞白血病英文名稱：Jurkat（懸?。?/span>

HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

磷脂酶A1(PLA1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)天然蛋白英文名稱： Native Advanced Glycation

I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL

試劑耗材
CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)說明書2,500 U (10 x 250 U)FastStart Taq DNA Pol. dNTPack

1,000 U for up to 2,000 reactions of 20 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, GMP Grade ( up to 3 kb) 5 U/µl

10 x 5 ml (for 2,000 reactions of 50 µl final reaction volume)FastStart PCR Master 50 ml

2,500 U (10 x 250 U) for up to 1,000 reactions of 50 µl final volume each containing 2.6 U enzyme blendExpand High Fidelity PCR System, dNTPack(up to 5 kb)

5,000 U (20 x 250 U)FastStart Taq DNA Pol. dNTPack

5,000 U (20 x 250 U)Taq DNA Polymerase dNTPack 500

10 x 1.25 ml (for 500 reactions of 50 µl final reaction volume)FastStart TaqMan Probe Master

100 U for up to 40 reactions of 50 µl final volume each containing 2.6 U enzyme blendExpand High Fidelity PCR System, dNTPack( up to 5 kb)
CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。