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          豬鏈球菌通用型和2型檢測試劑盒

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          • 豬鏈球菌通用型和2型檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-02-17 12:22:04瀏覽次數(shù):507

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          貨號 FS-01H4039 應用領域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
          豬鏈球菌通用型和2型檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:phospho-HDAC2(Ser394) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格: 0.1ml
          PPM2C 蛋酸酶2C抗體 規(guī)格: 0.2ml
          Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
          Acylglycerol Kinas

          詳細介紹

          PCR實驗方法步驟:

          方法

          1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

          10×PCR buffer

          5 μl     dNTP mix (2mM)

          4 μl     引物1(10pM)

          2 μl     引物2(10pM)

          2 μl     Taq酶 (2U/μl)

          1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

          1 μl      加ddH2O至 50 μl

          產(chǎn)品特點:

          ◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;

          ◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;

          ◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;

          ◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

          操作流程:

          收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

          特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

          產(chǎn)品名稱

          規(guī)格

          貨號

          豬鏈球菌通用型和2型檢測試劑盒

          50T

          FS-01H4039

           


          操作流程.jpg

           

          實時熒光定量PCR:

          實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的:

          1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。

          2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。

          外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

          定量PCR方法:

          a、競爭法

          選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。

          b、內(nèi)參照法

          在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測

          使用方法:

          一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。

          1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

          2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

          3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

          4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

          5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

          6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

          二、樣品 DNA 的制備

          7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

          8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

          三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)

          9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

          馬普林 規(guī)格: 100mg

          552-41-0丹皮 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

          281-23-2金剛烷 規(guī)格: 20mg

          2447-54-3血根 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

          564-25-0強力 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

          129741-57-7白頭翁皂B4 規(guī)格: 20mg

          4852-22-6原花青;Procyanidin 規(guī)格: 20mg

          15291-75-5銀杏內(nèi)酯A 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

          木芙蓉葉 規(guī)格: 1g

          1081-34-1α-三聯(lián) 規(guī)格: 20mg

          豬鏈球菌通用型和2型檢測試劑盒PANK1  泛激1抗體 規(guī)格: 0.2ml

          Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗貂IgG 規(guī)格: 0.1mlTransketolase(CT)  轉(zhuǎn)酮(轉(zhuǎn)羥乙醛)抗體(C端) 規(guī)格: 1ml

          BRCC4/BRCC45  易感基因復合4抗體 規(guī)格: 0.2ml

          Tsg101  瘤易感基因101抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Mink IgG/FITC  FITC標記的兔抗貂IgG 規(guī)格: 0.3ml

          CCDC30  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域30抗體 規(guī)格: 0.2ml

          KRIT1  腦海綿狀管畸形1抗體 規(guī)格: 0.2mlCYBR1  細胞色B還原1抗體 規(guī)格: 0.2ml

          KIST/UHMK1  /激KIST抗體(激相互作用與白病相關(guān)基因) 規(guī)格: 0.2ml

          Phospho-PBK/TOPK(Thr9)  磷化PDZ連接激/T-LAK細胞源激抗體 規(guī)格: 0.1mlEphA7/Eph receptor A7  激受體A7抗體 規(guī)格: 0.2ml

          Prohibitin  抑制/瘤抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

          PLAU/UPA/Urokinase  尿激型纖溶原激活因子抗體 規(guī)格: 0.1mlANKRD28  錨重復域28抗體 規(guī)格: 0.2ml

          phospho-MAP4K1(Ser171)  磷化造祖細胞激抗體 規(guī)格: 0.1ml

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