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PPRV小反芻獸疫檢測試劑盒（酶免法）

PPRV小反芻獸疫檢測試劑盒（酶免法）

 小反芻獸疫病毒屬副黏病毒科麻疹病毒屬。與牛瘟病毒有相似的物理化學(xué)及免疫學(xué)特性。病毒呈多形性，通常為粗糙的球形。病毒顆粒較牛瘟病毒大，核衣殼為螺旋中空桿狀并有特征性的亞單位，有囊膜。病毒可在胎綿羊腎、胎羊及新生羊的睪丸細胞、Vero細胞上增殖，并產(chǎn)生細胞病變(CPE)，形成合胞體。

【產(chǎn)品名稱】

通用名：羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus （ELISA）

【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒

【預(yù)期用途】 小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒（Peste des Petits Ruminants Virus，PPRV）引起的一種急性接觸性傳染病，其特征為口腔、舌粘膜糜爛、流淚、流鼻液。本病的易感動物為山羊，也可感染綿羊、白尾鹿等，但對牛無感染性。

本試劑用于檢測羊血清中小反芻獸疫病毒抗體，可用于小反芻獸疫疫苗免疫效果評價。

【原    理】

    本試劑盒系由預(yù)包被小反芻獸疫病毒重組抗原的酶標板、抗體工作液、酶標記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用競爭酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測羊血清、血漿樣本中小反芻獸疫病毒抗體。實驗時在酶標板中加入待檢樣本和抗體工作液，經(jīng)溫育后洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，若樣品中含有小反芻病毒抗體則將阻斷抗體工作液與酶標板上抗原結(jié)合，從而使后續(xù)反應(yīng)不出現(xiàn)顯色；反之則出現(xiàn)顯色；顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有小反芻獸疫病毒抗體。

【試劑盒組成】

【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處（2-8℃），有效期期12個月。

    包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。

【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。

【樣品準備】

1.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水20倍稀釋成工作洗滌液。

2.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

3.用工作洗滌液將待檢血清樣本按5倍稀釋（如10μl樣本加入40μl工作洗滌液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

【檢驗方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標板條，設(shè)陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品50μl。

4.每孔加抗體工作液50μl，混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

5.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

6.每孔加酶標記物100μl，置37℃反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)15分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。

以下是部分檢測試劑盒：