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          PT-K75細(xì)胞

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          • PT-K75細(xì)胞

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          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號
          • 品牌 其他品牌
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 無錫市

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          更新時間:2024-06-13 07:04:30瀏覽次數(shù):6744

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25方瓶
          細(xì)胞接受后的處理:
          1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
          2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
          3)離心棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng)。
          4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代。
          5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

          詳細(xì)介紹

            1.  

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1. 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
          2. 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3. 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
            • 細(xì)胞處理:
          4. 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          5. 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
          6.  

          1.      將培養(yǎng)瓶中細(xì)胞輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液。

          2.      根據(jù)細(xì)胞的生長狀態(tài),按1:2或以上比例用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將合適量培養(yǎng)液移入到T-25培養(yǎng)瓶中或T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

          3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。

           

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