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          首頁(yè)   >>   技術(shù)文章   >>   賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問(wèn)題

          上海硅儀生化科技有限公司

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          賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問(wèn)題

          閱讀:6175      發(fā)布時(shí)間:2023-6-26
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          問(wèn)題描述

          可能原因

          解決方案

          軟件問(wèn)題

          提示后密封清洗液用完,添加后密封清洗液后仍然報(bào)錯(cuò)

          重新啟動(dòng)蠕動(dòng)泵:進(jìn)入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active,點(diǎn)擊enter即可

          柱溫箱溫度已達(dá)到規(guī)定范圍,但仍顯示未就緒

          柱溫箱的平衡時(shí)間設(shè)置過(guò)長(zhǎng),可在儀器方法中修改

          如何查看紫外燈能量

          VWD:打開(kāi)UV界面的“Wellness"選項(xiàng)即可查看燈壽命和使用時(shí)間;DAD:打開(kāi)UV界面的“Wellness"選項(xiàng)可查看燈的使用時(shí)間,在Startup界面可查看燈能量

          如何設(shè)置序列或者進(jìn)樣完成后自動(dòng)打印/導(dǎo)出報(bào)告

          在Queue界面的“Report setup"項(xiàng)下進(jìn)行設(shè)置

          峰面積較小的色譜峰無(wú)法自動(dòng)積分

          在Cobra向?qū)е性O(shè)置合適的基線噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積

          如何去掉報(bào)告中的變色龍水印

          打開(kāi)管理控制臺(tái)——全局策略——水印,將“打印水印"的勾去掉即可

          Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無(wú)法自動(dòng)識(shí)別樣品盤(pán)類(lèi)型

          1)齒輪松動(dòng),聯(lián)系工程師;2)樣品盤(pán)上的二維碼損壞或有液滴;3)正確放置樣品盤(pán),使A1號(hào)位在左后方

          Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無(wú)法正常進(jìn)樣

          重新關(guān)好自動(dòng)進(jìn)樣器的門(mén)

          Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器是否需要校正針位

          不需要

          壓力升高

          色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類(lèi)等發(fā)生變化)

          比較相同條件下壓力的變化趨勢(shì),若壓力升高,再按照下述原因進(jìn)行排查

          保護(hù)柱的柱芯污染

          更換新的柱芯

          進(jìn)樣閥load狀態(tài)壓力正常,切至inject狀態(tài)時(shí)壓力升高,可能是六通閥或進(jìn)樣針堵塞

          超聲進(jìn)樣針/六通閥的定子和轉(zhuǎn)子,若無(wú)效則更換

          靜態(tài)混合器堵塞

          反沖靜態(tài)混合器,無(wú)效則更換。平常操作時(shí):流動(dòng)相的純度需要滿足分析檢測(cè)的要求、檢測(cè)泵內(nèi)密封圈的密封性

          針座密封堵塞

          對(duì)針座密封超聲清洗

          色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞

          反沖流通池(注意壓力:DAD/VWD耐壓120bar;FLD耐壓20bar),無(wú)效則聯(lián)系工程師

          壓力傳感線接觸不良

          重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

          新色譜柱壓力逐漸升高

          新色譜柱的填料在流動(dòng)相作用下逐漸壓實(shí),柱壓會(huì)逐漸升高,但使用一段時(shí)間后,相同條件下壓力會(huì)趨于穩(wěn)定

          色譜柱污染

          按照色譜柱說(shuō)明書(shū)進(jìn)行沖洗和在生,無(wú)效則更換

          CAD的噴針堵塞

          取出噴針進(jìn)行超聲清洗(注意針尖不要和瓶底接觸)。建議檢測(cè)器入口安裝不銹鋼過(guò)濾器,阻止柱填料流失

          排氣泡時(shí)未擰松purge閥

          排氣泡前逆時(shí)針擰松1.5~2圈

          柱前預(yù)熱或者柱后冷卻器堵塞

          反沖,需要時(shí)更換

          壓力ZUI高限設(shè)置不合適引起壓力超限

          根據(jù)色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設(shè)置合適的限值

          樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞

          先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時(shí):若流動(dòng)相含有緩沖鹽,建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動(dòng)相平衡;為避免樣品在流動(dòng)相中析出,建議采用初始流動(dòng)相溶解樣品

          壓力降低

          色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類(lèi)等發(fā)生變化)

          比較相同條件下壓力的變化趨勢(shì),若壓力降低,再按照下述原因進(jìn)行排查

          管路沒(méi)有擰緊導(dǎo)致溶液泄露

          重新擰緊泄露處的管路

          流動(dòng)相走空

          加入流動(dòng)相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設(shè)置合適的壓力低限

          系統(tǒng)流路中含有大量氣泡

          重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

          過(guò)濾頭堵塞:某通道溶液無(wú)法抽出,取下過(guò)濾頭后恢復(fù)正常

          超聲清洗過(guò)濾頭,無(wú)效則更換

          單向閥堵塞:所有通道的溶液均無(wú)法抽出

          超聲清洗單向閥,無(wú)效則更換

          脫氣機(jī)管路堵塞:某通道溶液無(wú)法抽出,短接脫氣機(jī)后恢復(fù)正常

          沖洗脫氣機(jī)管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路,尤其水相通道

          比例閥損壞:某通道溶液無(wú)法正常抽出,更換比例閥接口后恢復(fù)正常

          聯(lián)系工程師

          針座密封發(fā)生漏液

          更換針座密封

          排氣后忘記關(guān)閉Purge閥

          流動(dòng)相排完氣泡后及時(shí)擰緊purge閥,但不需要擰得過(guò)緊

          purge閥密封性變差

          更換新的purge閥

          壓力傳感線接觸不良

          重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

          進(jìn)樣時(shí)吸入空氣

          1)設(shè)置合適的進(jìn)樣高度;2)樣品量太少時(shí)可加襯管

          進(jìn)樣瞬間壓力下降,后又恢復(fù)正常

          U3000:正常現(xiàn)象,吸入的樣品溶液沒(méi)有經(jīng)過(guò)預(yù)壓縮,為常壓狀態(tài),高壓的流動(dòng)相與常壓樣品接觸時(shí)會(huì)引起壓力下降;Vanquish:不會(huì)出現(xiàn)該情況

          轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損,導(dǎo)致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

          更換轉(zhuǎn)子

          單向閥裝反

          重裝單向閥

          壓力波動(dòng)

          流動(dòng)相含有氣泡(一般呈規(guī)律的鋸齒狀波動(dòng))

          重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

          過(guò)濾頭部分堵塞;流動(dòng)相瓶及低壓區(qū)輸液管路被菌類(lèi)或藻類(lèi)污染

          超聲清洗過(guò)濾頭和流動(dòng)相瓶,沖洗低壓區(qū)輸液管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路,尤其水相通道

          單向閥部分堵塞

          超聲清洗單向閥,無(wú)效則更換。平常操作時(shí):建議儀器不要長(zhǎng)期保存在純乙腈中;若流動(dòng)相中緩沖鹽濃度過(guò)高可增加泵前溶液的混合體積

          輸液泵的密封圈發(fā)生泄漏

          更換輸液泵的柱塞桿或密封圈

          流動(dòng)相混合不均勻

          1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

          進(jìn)樣后壓力不穩(wěn)定,且保留時(shí)間重現(xiàn)性不佳

          在儀器方法的自動(dòng)進(jìn)樣器界面設(shè)置與泵同步

          脫氣盒損壞

          聯(lián)系工程師。平常操作時(shí),建議:1)所有流動(dòng)相的過(guò)濾頭均置于液面以下,減少真空泵的工作負(fù)荷;2)使用正相溶劑時(shí)短接脫氣機(jī)

          比例閥損壞

          聯(lián)系工程師

          計(jì)量泵裝置密封圈發(fā)生泄漏

          更換計(jì)量泵的柱塞桿或密封圈

          保留時(shí)間前移

          色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類(lèi)等發(fā)生變化)

          比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢(shì),若前移,再按照以下原因進(jìn)行排查

          流動(dòng)相混合不均勻

          1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

          色譜柱未充分平衡

          延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

          色譜柱污染

          表面活性劑污染時(shí)該現(xiàn)象尤為明顯,根據(jù)色譜柱的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行沖洗,需要時(shí)更換色譜柱

          固定相塌陷

          更換色譜柱。平常操作時(shí):在色譜柱規(guī)定范圍內(nèi)進(jìn)行使用

          緩沖鹽吸潮導(dǎo)致配置的濃度過(guò)低

          將易潮解的鹽置于干燥器中保存

          保留時(shí)間后移

          色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類(lèi)等發(fā)生變化)

          比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢(shì),若后移,再按照以下原因進(jìn)行排查

          流動(dòng)相混合不均勻

          1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

          轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損,導(dǎo)致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

          更換轉(zhuǎn)子

          色譜柱未充分平衡

          延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

          系統(tǒng)流路含有氣泡

          重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

          流動(dòng)相組成發(fā)生變化

          對(duì)于提前混合好的流動(dòng)相,注意置于陰涼處密封保存

          比例閥故障

          聯(lián)系工程師

          柱外死體積增加

          更換內(nèi)徑更小、更短的管路進(jìn)行連接

          保留時(shí)間不穩(wěn)定

          單向閥堵塞

          超聲清洗單向閥,無(wú)效則更換

          平衡時(shí)間不足

          延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

          流動(dòng)相混合不均勻

          1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

          比例閥故障

          聯(lián)系工程師

          未設(shè)置柱溫

          在儀器方法中設(shè)置合適的柱溫

          系統(tǒng)流路含有氣泡

          重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

          前延峰

          分離不佳,大峰前部包有雜質(zhì)小峰

          改進(jìn)色譜分析條件

          柱頭前端過(guò)濾篩板部分堵塞

          更換色譜柱或低流速反沖色譜柱

          色譜柱塌陷

          更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應(yīng)用條件(壓力或pH值范圍)

          溶劑效應(yīng)

          1)降低進(jìn)樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度;3)調(diào)換進(jìn)樣閥接口(U3000:調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號(hào)位;Vanquish:調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號(hào)位)

          色譜柱過(guò)載

          減少進(jìn)樣量或增加柱容量(選用更大內(nèi)徑色譜柱)

          拖尾峰

          分離不佳,大峰后部包有雜質(zhì)小峰

          改進(jìn)色譜分析條件(緩沖鹽的濃度、流動(dòng)相的pH值、洗脫條件等)

          樣品與硅烷官能團(tuán)反應(yīng)(常規(guī)C18柱分析堿性化合物)

          建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑

          柱外體積過(guò)大

          進(jìn)樣器和色譜柱間使用更短、更細(xì)的管路連接

          色譜柱過(guò)載

          減少進(jìn)樣量或增加柱容量(選用更大內(nèi)徑色譜柱)

          色譜柱柱效下降

          更換色譜柱或保護(hù)柱

          檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

          使用推薦值

          分叉峰或雙峰

          分離不佳

          改進(jìn)色譜條件

          保護(hù)柱或色譜柱污染

          1)更換保護(hù)柱;2)清洗或更換分析柱

          柱頭死體積過(guò)大

          更換合適的管路接頭或更換色譜柱(色譜柱前端塌陷)

          溶劑效應(yīng)

          1)降低進(jìn)樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度;3)調(diào)換進(jìn)樣閥接口(U3000:調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號(hào)位;Vanquish:調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號(hào)位)

          色譜柱溫度影響

          一般發(fā)生在色譜柱內(nèi)徑大于3 mm,并且溫度條件很高的情況下。選用預(yù)加熱來(lái)確保色譜柱中流動(dòng)相溫度不會(huì)梯度變化

          儀器轉(zhuǎn)子密封磨損

          更換轉(zhuǎn)子密封

          鬼峰

          上一針樣品未全都洗脫

          延長(zhǎng)分析時(shí)間或改用梯度洗脫

          進(jìn)樣器交叉污染

          1)增加洗針程序;2)清洗或更換易污染部件,如針、針座密封

          CAD檢測(cè)器被污染

          以50%甲醇沖洗

          流動(dòng)相、色譜柱或流通池污染

          逐一排查原因,采取相應(yīng)措施,如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速?zèng)_洗,特別注意水相流動(dòng)相的污染

          流通池有氣泡

          排除氣泡

          不出峰

          未進(jìn)樣,或進(jìn)樣量不足

          1)保證樣品瓶中樣品量足夠;2)檢查進(jìn)樣類(lèi)型是否為“Blank"

          過(guò)高的背景電流/噪音(CAD)

          選擇純度較高的流動(dòng)相

          樣品容易揮發(fā)(CAD)

          查看分析物的蒸氣壓

          色譜柱柱效下降

          按照說(shuō)明書(shū)對(duì)色譜柱進(jìn)行在生,無(wú)效則更換色譜柱

          負(fù)峰

          不合適的參比波長(zhǎng)(DAD)或RI檢測(cè)器參比池未充分沖洗 

          DAD:設(shè)置合適的參比波長(zhǎng)或不使用該功能;RI:增加平衡時(shí)間

          樣品溶解液與流動(dòng)相差別太大

          使用流動(dòng)相溶解樣品

          洗脫物比流動(dòng)相吸收值低

          更換波長(zhǎng)或使用低吸收溶劑做流動(dòng)相

          錯(cuò)誤的信號(hào)輸出極性

          檢查信號(hào)輸出極性,請(qǐng)打400電話

          廢液引起(CAD) 

          確保PEEK管在廢液瓶中

          數(shù)據(jù)處理時(shí)設(shè)置了色譜圖扣除命令

          不使用色譜圖扣除的功能

          RI檢測(cè)器未關(guān)閉參比池通道(樣品連續(xù)流過(guò)樣品池和參比池)

          關(guān)閉參比池通道

          霧化針污染(CAD)

          異丙醇超聲清洗霧化針,無(wú)效則更換

          毛刺峰

          流通池進(jìn)氣泡

          流通池出口增加長(zhǎng)度的背壓管,但不能超過(guò)流通池的耐壓范圍(注意:FLD流通池耐壓<20bar,不能增加被壓管)

          電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

          常見(jiàn)于CAD/ECD,打400電話

          CAD檢測(cè)器被污染

          以50%甲醇沖洗,無(wú)改進(jìn)打400電話

          峰面積減小

          進(jìn)樣器堵塞

          逐段排查阻塞點(diǎn),需要時(shí)請(qǐng)打400電話

          檢測(cè)器燈能量偏低

          更換新燈

          檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置不合理

          設(shè)置合理的檢測(cè)波長(zhǎng)

          待測(cè)物降解

          使用合適的保存條件,如使用含溫控單元的自動(dòng)進(jìn)樣器

          CAD霧化溫度過(guò)高,半揮發(fā)成份流失

          降低霧化溫度

          儀器有漏液

          檢查漏液位置

          峰面積重現(xiàn)性差

          自動(dòng)進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子密封/針座密封發(fā)生磨損

          更換新的轉(zhuǎn)子密封/針座密封,需要時(shí)請(qǐng)打400電話

          進(jìn)樣針的針尖彎曲或堵塞

          超聲清洗進(jìn)樣針(注意針尖不要接觸瓶底),無(wú)效則更換

          進(jìn)樣前針位未處于inject狀態(tài)

          進(jìn)樣前,保證針位處于inject狀態(tài)

          進(jìn)樣器的注射器進(jìn)氣泡

          進(jìn)樣前執(zhí)行灌注注射器命令排除注射器內(nèi)氣泡,需要時(shí)需手動(dòng)排氣泡

          自動(dòng)進(jìn)樣器抽樣速度過(guò)快

          降低進(jìn)樣針的抽樣速度,使抽樣時(shí)間至少3-5秒

          自動(dòng)進(jìn)樣器的注射器密封不嚴(yán)/注射器三通閥磨損

          更換新的注射器/注射器三通閥,需要時(shí)請(qǐng)打400電話

          基線周期性波動(dòng)

          泵壓力波動(dòng)

          采集壓力通道的信號(hào),尋找壓力波動(dòng)的原因

          管路或流通池中有氣泡

          流動(dòng)相充分脫氣

          基線無(wú)規(guī)律波動(dòng)

          溫度波動(dòng)

          控制好溫度,使用對(duì)溫度較敏感的RI檢測(cè)器時(shí)要尤為注意

          流動(dòng)相混合不均勻

          1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

          檢測(cè)器燈能量過(guò)低

          更換新燈

          流通池被污染

          用不同極性溶劑沖洗流通池

          流動(dòng)相或色譜柱被污染

          更換流動(dòng)相或色譜柱

          電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

          常見(jiàn)于CAD/ECD,請(qǐng)打400電話

          紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)低于溶劑截止波長(zhǎng)

          1)選擇合適的流動(dòng)相進(jìn)行分析;2)改變檢測(cè)波長(zhǎng)

          其他

          蠕動(dòng)泵抽不出溶液

          1)彎頭注射器抽出管路氣泡;2)清理擠壓部位;3)更換新的軟管

          提示密封圈泄露超限

          1)更換密封圈和/或柱塞桿;2)向右擠壓蠕動(dòng)泵杠桿

          Vanquish更換流通池時(shí)的注意事項(xiàng)

          先關(guān)掉檢測(cè)器模塊的總電源再進(jìn)行更換

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