細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。
細(xì)胞培養(yǎng)基必須含有充分的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),才能滿足新細(xì)胞合成、細(xì)胞代謝等生化反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。主要成份是水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。此外,還可能含有血清、血清替代成分、pH指示劑等。
按照發(fā)展歷史,大致可分為平衡鹽溶液、天然、合成、無血清、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。
1、平衡鹽溶液
主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。
2、天然培養(yǎng)基
天然培養(yǎng)基指來自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前廣泛使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是不可少。
3、合成培養(yǎng)基
合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基。
4、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基
經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份*明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。
5、個(gè)性化細(xì)胞培養(yǎng)基
嚴(yán)格意義上來說,它不在傳統(tǒng)分類之列,其具體是指一類根據(jù)細(xì)胞特性、細(xì)胞培養(yǎng)工藝特點(diǎn)、使用者需求習(xí)慣而量身定制的,主要目的是提高細(xì)胞產(chǎn)率、產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)品安全性和降低血清的使用等。