魚源性成分(Fish)實時熒光PCR試劑盒【檢驗原理】

1.1 結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數增長曲線。

可疑：檢測通道 Ct 值>35.0，且出現典型擴增曲線的樣本建議重復試驗，重復試驗結果出現 Ct 值≤35.0 和典型擴增曲線者為陽性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測結果無 Ct 值且無明顯的擴增曲線。

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本試劑盒采用探針法實時熒光 PCR 技術，設計一對魚源性成分特異性引物，結合一條特異性探針，用熒光 PCR 技術對魚源性成分的核酸進行體外擴增檢測，用于臨床上對病原學輔助診斷。

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【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融少于 7 次，有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有魚的成分。現代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質地等特性，因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術已經無法對食材的真?zhèn)芜M行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性，因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。?

1.1 DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液（固體標本加入50μL 核酸提取液）， 100℃恒溫處理 10min，13,000 rpm 離心 5min，取上清液轉移至新的 1.5mL EP 管，-20℃保存；

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產的DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2. 檢測方法的局限性

a. 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

c. 陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；

f. 試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果；

g. 本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

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