CAS | 無 | 純度 | 100% |
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分子量 | 無 | 分子式 | 無 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 48測試 |
貨號 | XK-DT-1421 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品,化工,生物產業(yè),制藥 |
主要用途 | 科研 |
說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
上海晅科生物科技有限公司 |
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參考價 | ¥1500-¥2800 |
具體成交價以合同協(xié)議為準 |
更新時間:2023/03/08 20:10:51瀏覽次數(shù):1569
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霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測試劑盒
【產品名稱】
通用名稱:霍亂弧菌O1(VC O1)檢測試劑盒(熒光PCR法)
【包裝規(guī)格】50T/盒
【預期用途】
本試劑盒適用于檢測樣本中的霍亂弧菌O1(VC O1),用于霍亂弧菌O1(VC O1)感染的輔助診斷。
【檢驗原理】
霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測試劑盒采用 TaqMan 探針法實時熒光 PCR 技術,設計一對霍亂弧菌O1(VC O1)特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對霍亂弧菌O1(VC O1)的核酸進行體外擴增檢測,用于對可疑感染者的病原學檢測。
說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
【核酸提取】
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取,請按照試劑說明書進行操作。
1. 試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;反應管數(shù)每滿 10 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,21μL/管。
2. 加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,分別加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻, 短暫離心。
3. PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
3.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;
3.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25μL;
熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,選擇 None 即可。
3.3 推薦循環(huán)參數(shù)設置:
4. 結果分析判定
4.1 結果分析條件設定
設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節(jié)),以及 Threshold的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。
4.2 結果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;
可疑:檢測通道 35值≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35值≤38,且曲線有明顯的增長曲線, 判定為陽性,否則為陰性;
陰性:樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
5. 質控標準
陰性質控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示;
陽性質控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
6. 檢測方法的局限性
6.1 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
6.2 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結果;
6.3 陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;
6.4 病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
6.5 不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;
6.6 試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果;
6.7 本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
【注意事項】
1. 所有操作嚴格按照說明書進行;
2. 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,*混勻并短暫離心;
3. 反應液應避光保存;
4. 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5. 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
6. 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染;
7. 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8. 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
【生產企業(yè)】
企業(yè)名稱:上海晅科生物科技有限公司
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