產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱
MCF10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞(通過STR)
( Cat.No: XK-Y1607)
適用范圍
本產(chǎn)品*于科學(xué)研究, 絕不可
作為人類或者動物疾病的治療產(chǎn)品使
用。
*培養(yǎng)基配置
DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+馬血清( 5%) +胰島
素( 10ug/ml) +表皮生長因子(20ng/ml)+霍
亂毒素(100ng/ml)+氫化( 0.5ug/ml)
細(xì)胞圖片
細(xì)胞傳代
1. 細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí), 棄 25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液, 用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中, 倒置顯微鏡下觀
察, 待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml *培養(yǎng)液終止消化, 再輕輕吹打
細(xì)胞使之脫落, 然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中, 1000rpm 離心
5min;
3. 棄上清, 沉淀細(xì)胞用 1-2ml *培養(yǎng)基重懸, 然后按 1:2 比例進(jìn)
行分瓶傳代, 最后放入 37℃ , 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇
1. 從液氮中取出細(xì)胞凍存管( 注意: 佩戴防爆管面具) , 快速將其
置入 37℃ 水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶, 然后用 75%的酒精擦
拭凍存管外壁;
2. 將凍存管中的細(xì)胞移至含 6ml *培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,
1000rpm 離心 5min;
3. 棄上清, 沉淀用 6ml *培養(yǎng)基重懸, 接種 25cm2培養(yǎng)瓶, 于 37℃ ,
5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存
1. 細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí), 棄 25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液, 用 PBS 清洗細(xì)胞一次;
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中, 倒置顯微鏡下觀
察, 待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化, 輕輕吹打細(xì)胞使
之脫落, 然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中, 1000rpm 離心 5min;
3. 用適量的凍存液( FBS: DMSO=9 : 1) 重懸細(xì)胞, 并放置于凍
存管中;
4. 先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h, 然后將其移入-80℃ 過夜, 24h
后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。 使用程序降溫盒可直接放入-80℃ 。
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