產(chǎn)品簡介
生長特性: 懸?。╯uspension)培養(yǎng)環(huán)境:37℃ , 5%CO2 , 95%AIR。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱
L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細胞(通過STR)
( Cat.No: XK-Y2047)
適用范圍
本產(chǎn)品*于科學研究, 絕不可
作為人類或者動物疾病的治療產(chǎn)品使
用。
*培養(yǎng)基配置
DMEM( 高糖) +10% FBS+1% P/S
細胞圖片
產(chǎn)品描述
種屬: 組織: 疾病: | 鼠源(Mouse) 血淋巴細胞(blood lymphocytes) 淋巴瘤(lymphoma) |
基本形態(tài): 淋巴母細胞樣(lymphoblast) 生長特性: 懸?。╯uspension) | |
培養(yǎng)環(huán)境: | 37℃ , 5%CO2 , 95%AIR |
拆包
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液, 如有, 請拍照并及時與技
術(shù)聯(lián)系。
2.請立即將細胞從包裝盒中取出, 并按照下方操作步驟進行處理。
T25 培養(yǎng)瓶中的細胞操作步驟
1. 75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 顯微鏡觀察細胞生長情況, 并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存( 40
× ,100× ,200× 各一張) 前三天照片為重要售后依據(jù), 不提供或未
拍照默認收到狀態(tài)良好。
3. 不要打開培養(yǎng)瓶蓋, 將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后
再做處理, 以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
4. 貼壁細胞: 若細胞密度較小, 無菌操作, 去掉培養(yǎng)基。 每瓶添加
配制好的*培養(yǎng)基 5-6ml。 放到 37 度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 待細胞密度到
80%以上, 進行傳代。
懸浮細胞: 將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基離心收集, 重懸計數(shù)根據(jù)密度進行
分瓶, 密度在 3x10^5/ml 為宜。
注意: *次傳代比例建議 1:2, 之后可根據(jù)細胞密度和增
殖情況適當調(diào)整。
凍存管細胞的操作步驟
1. 收到細胞后, 檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。 如有外包裝
破損干冰已*揮發(fā)等問題, 請即時聯(lián)系。
2. 將細胞取出轉(zhuǎn)移至-80 度冰箱(不超過一周) 或液氮保存,建議盡早
復蘇。
3. 復蘇*管后有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系, 會有技術(shù)人員與
您溝通指導后再復蘇第二管。
注意: 為保證細胞的高存活率, 收到產(chǎn)品后, 請立即解凍
復蘇細胞。
細胞傳代
待細胞達到一定密度( 不超過 1x10^6/ml) 可按照以下方法換液培養(yǎng)
或傳代。
方法①: 收集細胞, 1000rpm 離心 5min, 棄去上清液, 補加 1-2mL
培養(yǎng)液后吹勻, 將細胞懸液按 1: 2 到 1: 3 的比例分到新的含培養(yǎng)
基的新皿中或者瓶中。
方法②: 可選擇半數(shù)換液方式, 棄去半數(shù)培養(yǎng)基后, 將剩余細胞懸
起, 將細胞懸液按 1: 2 到 1: 3 的比例分到新的含培養(yǎng)基的新皿中
或者瓶中。
細胞復蘇
1) 從液氮中取出細胞凍存管( 注意: 佩戴防爆管面具) , 快速將其
置入 37℃ 水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶, 然后用 75%的酒精擦
拭凍存管外壁;
2) 將凍存管中的細胞移至含 6ml *培養(yǎng)基的 15ml 離心管中,
1000rpm 離心 5min;
3) 棄上清, 沉淀用 6ml *培養(yǎng)基重懸, 接種 25cm2 培養(yǎng)瓶, 于
37℃ , 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 第二天, 換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存
1. 將細胞懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中, 1000rpm 離心 5min;
2. 用適量的凍存液( FBS: DMSO=9 : 1) 重懸細胞, 并放置于凍
存管中;
3. 先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h, 然后將其移入-80℃ 過夜, 24h
后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。 使用程序降溫盒可直接放入-80℃ 。
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