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流動相為什么要過濾？
*，色譜系統(tǒng)是一種精密的設備，對結果的準確性要求也很高，因此，由于色譜系統(tǒng)的精密性和對結果分析的準確性要求，對樣品的過濾顯得尤為重要。我們在樣品制備的每步不可掉以輕心。正如液相色譜系統(tǒng)的說明書中所要求的，流動相得須使用HPLC的試劑，且使用前須過濾。
為什么要減壓過濾？
過濾可以保護色譜系統(tǒng)和色譜柱，長柱子的使用壽命，改善數(shù)據(jù)的精度。過濾可以消由于摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動。同時，過濾也能夠去流動相中的顆粒雜質(zhì)，免它們對內(nèi)密封圈造成損害，或堵塞小孔管道、層析柱、線內(nèi)過濾器及保護柱。
一般流動相在上儀器前須經(jīng)過兩個步驟：減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個目的，
一個是過濾掉氣體，尤是有機相和水相混合的時候，會產(chǎn)生大量的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱，所以要除掉。
一個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的，這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑，過濾的流動相里面小的毛絮啊，顆粒啊不會進入色譜柱。
超聲的主要目的也是為了脫氣，另外還助令溶液混合均勻等作用。不過超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡，所以沒要超聲太久的時間，3-5min夠了。
總而言之，都是為了保護儀器和色譜柱，防氣泡和雜質(zhì)進入。
過濾用什么？
一般建議使用的過濾器。也許有人認為，過濾裝置貌似挺貴，算了，買個砂芯漏斗得了。哎，同學，這么貴的房子都買了，還在乎一把鎖？
使用的流動相過濾器，簡單，而且全。
如何過濾？
只要按照下圖的說明，依次放置好濾器和管線，再啟動真空泵可開始過濾。
在操作過程中，有一點需要注意，須用干燥的過濾膜和干燥的支撐底座進行過濾，以防空氣在膜上形成氣阻，這個阻力可使液體流速下降或阻止液體流出。在將過濾膜放在濾器上之前，須保濾器是清潔、干燥的。