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等度洗脫和梯度洗脫的優(yōu)缺點

在液相色譜分離條件中，重要的參數(shù)就是洗脫條件，其中分離條件又分為等度洗脫和梯度洗脫。
梯度洗脫:在同一個分析周期中，按程序不斷改變流動相的濃度配比
等度洗脫則是指從頭到尾只是用同一個流動相。
用不用梯度洗脫，主要看雜質(zhì)的情況。同一物質(zhì)有梯度和等度兩種條件時，選梯度較高。雜質(zhì)與雜質(zhì)、主峰、溶劑峰的分離度要好(不好的話就要用梯度)。
(1)雜質(zhì)和主成分極性相差很大，雜質(zhì)要全能洗脫出來(有時等度情況下從兩三個小時雜質(zhì)也沖出不來，就須考慮等度)。
(2)雜質(zhì)和主成分極性相差較大，雜質(zhì)出峰太晚(等度沖兩個小時出來個雜質(zhì)，就可以通過梯度縮短檢樣時間)
(3)還有就是雜質(zhì)極性比主峰的大，等度時要想主峰時間適雜質(zhì)全堆在前邊，雜質(zhì)分開主峰又出峰太晚，這種情況也得考慮梯度洗脫。
在色譜分析時，等度洗脫和梯度洗脫各有優(yōu)點和劣勢。
等度洗脫
優(yōu)點
對于等度洗脫而言，由于方法運行時，流動相的比例不發(fā)生變化，所以它對儀器的要求不高，需要一個單元泵就可以運行方法。
其次，由于等度洗脫條件單一，所以比較容易用來摸索方法設(shè)置，例如改變流動相比例，改變柱溫等條件。
并且由于等度洗脫每次運行時的流動相比例相同，所以相同方法運行多個樣品時，樣品之間不需要設(shè)置平衡時間來讓系統(tǒng)恢復(fù)到所需的流動相比例。
缺點
但是它也有缺點，那就是越往后出峰的組分色譜峰越寬。
并且大多數(shù)等度洗脫的方法分析時間較長。

梯度洗脫
又稱為梯度淋洗或程序洗脫。
在氣相色譜中，為了改對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期，一般采用程序升溫的方法。而在液相色譜中對組分復(fù)雜的樣品則采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中，按程序不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。

優(yōu)點
而梯度洗脫能夠規(guī)避掉等度洗脫的問題，峰型得到改，很少拖尾。例如梯度洗脫的樣品峰，無論先出峰還是后出峰的組分，它們的峰形基本能保尖銳對稱。
其次由于梯度洗脫通常設(shè)置的流動相比例是讓洗脫強度越來越強，這樣能保在較短的時間內(nèi)，讓樣品中強保留組分也能被洗脫出來。
缺點
但是伴隨著這些優(yōu)點也會有對應(yīng)的缺點，先它對儀器的配置要求較高，通常需要配置四元泵或者二元泵。
其次它在每次運行樣品之間，需要設(shè)置的平衡時間，來讓系統(tǒng)中流動相的比例到達初始流動相比例。
之后，由于它的方法設(shè)置復(fù)雜，例如影響分離的有初始流動相比例、流動相的梯度變化、結(jié)束流動相比例、柱溫箱溫度等，所以方法的開發(fā)和優(yōu)化會較為復(fù)雜。而且有時引起基線漂移。

大家可以根據(jù)自身情況判斷應(yīng)該選用什么方法