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液質(zhì)聯(lián)用儀使用注意事項(xiàng)
液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，它以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動(dòng)相分離，被離子化后，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補(bǔ)，將色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力，與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對(duì)分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
一、質(zhì)譜儀工作環(huán)境要求：①周圍無強(qiáng)烈震蕩源及電磁感應(yīng)裝置;②電源要求接地交流電;③室溫要求15～28℃;④相對(duì)濕度要求20%～80%。
使用過程中要特別注意室內(nèi)溫度和濕度的控制。一般沒有外置飛行管的飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)環(huán)境的要求更嚴(yán)格，外部環(huán)境會(huì)直接影響質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性。質(zhì)譜儀采用兩級(jí)抽氣結(jié)構(gòu)，前級(jí)為機(jī)械泵，后級(jí)為分子渦輪泵工作時(shí)先由前級(jí)泵，將真空腔內(nèi)的壓強(qiáng)降低幾個(gè)數(shù)量級(jí)，再由后級(jí)泵降至工作所需壓強(qiáng)。
二、使用要求：1.開機(jī)：
質(zhì)譜儀的開機(jī)首先開氣，再開機(jī)械泵，再打開質(zhì)譜儀的電源，等真空度達(dá)到后再開啟分子渦輪泵，等真空度達(dá)到后才可以進(jìn)行調(diào)諧校正，一般至少需要抽12個(gè)小時(shí)才能達(dá)到。每次開機(jī)后都需要校正后才能使用質(zhì)譜儀。
2、樣品測試過程：(1)與液相色譜聯(lián)用時(shí)，流動(dòng)相需要先用<0.45μm的膜過濾，需要區(qū)別有機(jī)膜和水膜，樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉(zhuǎn)速離心去掉固體雜質(zhì)。(2)流動(dòng)相不能用難揮發(fā)的酸或鹽，如磷酸鹽和硼酸鹽，液相常用的TFA會(huì)抑制離子電離，也不建議使用;表面活性劑在質(zhì)譜中響應(yīng)很高，尤其是ESI源，所以所有管和器具的清洗不能用洗潔精，用來改善分離和色譜峰形的離子對(duì)試劑也應(yīng)慎用。與質(zhì)譜聯(lián)用時(shí)建議使用的是甲酸、乙酸、甲酸銨、乙酸銨和氨水等。(3)根據(jù)選用的離子源調(diào)整液相方法，ESI源一般用0.3~0.6mL/min，常規(guī)HPLC分析柱的規(guī)格是5μm，4.6×250mm的，一般流速都是1mL/min，可以采用柱后分流的方式來調(diào)整進(jìn)入質(zhì)譜的流量。同時(shí)要根據(jù)進(jìn)入質(zhì)譜的流量和樣品性質(zhì)調(diào)整霧化氣溫度和霧化氣的流量。
3、樣品測試結(jié)束后，需要清洗進(jìn)樣管路，清洗后停泵，待離子源溫度降低后再選擇待機(jī)狀態(tài)。
三、液質(zhì)日常定期維護(hù)
1、使用的穩(wěn)壓電源UPS，保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù)(特別是停電時(shí)對(duì)儀器的影響)。
2、每天用異丙醇溶液沖洗系統(tǒng)和清潔霧化室，定期開震氣閥震氣(對(duì)于ESI源，至少每星期做一次;對(duì)于APCI源，每天做一次)，保證毛細(xì)管潔凈。
3、流動(dòng)相流速不要過高，ESI離子源不要超過0.5ml/min，APCI不要超過1.0ml/min。
4、機(jī)械泵的泵油需要定期更換，一般半年更換一次，如果泵油看起來很臟，需要提前更換。更換泵油的時(shí)候需要將泵油全部倒出，再更換新的泵油，不同品牌的泵油不能混用。一般實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)譜儀都會(huì)在長假的時(shí)候進(jìn)行大的維護(hù)。
5、控制好樣品運(yùn)行的環(huán)境，包括溫度和濕度。
6、實(shí)驗(yàn)完畢后要清洗進(jìn)樣針、進(jìn)樣閥等，用過含酸的流動(dòng)相后，色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。
7、定期清洗樣品錐孔，關(guān)閉隔斷閥，取下樣品錐孔，先用甲醇：水：甲酸(45：45：10)的溶液超聲清洗10分鐘，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘，待晾干后再安裝到儀器上。
8、流動(dòng)相要現(xiàn)用現(xiàn)配，最好不要過夜，一定要新鮮。
9、定期更換電子倍增器。