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關(guān)于氯化血紅素檢測方法的文章及報(bào)道主要有紫外光譜法、熒光法、紅外光譜法、極譜法、可見光分光光度法、電極法等。

 

紫外和紅外光譜法

兩種光譜法原理類似，均是利用標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的紅外光掃描譜圖和紫外光掃描譜圖進(jìn)行比對，對圖譜的走向以及變化趨勢進(jìn)行比較。在紅外光掃描譜圖中，如果樣品與標(biāo)準(zhǔn)品具有相同的吸收特征，掃描譜圖形狀大體一致，可以以此說明試驗(yàn)所得樣品為氯化血紅素。在紫外光掃描譜圖中，標(biāo)準(zhǔn)品在波長為 380-410nm 范圍內(nèi)有最大吸收，但是因?yàn)槿軇┑牟煌?，會?dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品的最大吸收波長也不同。在相同實(shí)驗(yàn)條件下，如果樣品在同一波長處具有最大吸收，該方法可作為氯化血紅素的定性鑒定。袁曦對氯化血紅素口服液采用紫外光譜法對其氯化血紅素含量進(jìn)行檢測，采用波長為384nm 處對抗貧口服中的氯化血紅素進(jìn)行測定，結(jié)果表明在1.80-9.10ug/mL 線性范圍內(nèi)，R=0.9999，標(biāo)準(zhǔn)差是 0.67%，方法的平均回收率達(dá)到99.3%。

 

熒光法

熒光法是利用血紅素中卟啉的熒光特性，利用熒光光度計(jì)可檢測出樣本的熒光強(qiáng)度，從而計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量，如糞便中血紅素的定量測定，血紅蛋白在腸道中消解為血紅素，血紅素在腸道內(nèi)細(xì)菌的作用下，大部分被消解為卟啉，利用卟啉的熒光特性，可計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量。血紅素與草酸試劑共熱能脫去亞鐵離子，并被還原成具有熒光特性的卟啉，此條件下利用熒光法所測得的卟啉為腸道中全部的血紅素量。消解的血紅素除以血紅素總量即為血紅素腸道轉(zhuǎn)換率，由于出血部位越高，被消化吸收的時(shí)候越長，腸道的轉(zhuǎn)換率也越高，所以從腸道轉(zhuǎn)換率可以大概推算出腸道出血的部位。

 

可見光分光光度法

將血紅素溶解于 0.25%Na2CO3溶液中，在波長為 610nm 處有最大吸收峰值，楊淑琴在血紅素的鹽酸丙酮法提取工藝中有用該法對血紅素的含量作了測定。

 

極譜法

通過研究血紅素的極譜行為，以0.1mol/L NH3-NHCl 作為緩沖溶液，血紅素在-0.42V點(diǎn)出現(xiàn)一個(gè)靈敏的陰極波。利用該方法可檢測出zuidi血紅素濃度為8×10mol/L。

 

電極法

該法采用修飾后的石墨電極檢測血紅素，發(fā)現(xiàn)電極對血紅素的濃度反應(yīng)比較靈敏，濃度在 1×10～1×10mol/L范圍內(nèi)血紅素與電極反應(yīng)成線性關(guān)系。

 

其他

除了上面的方法外，還有一些關(guān)于測定氯化血紅素的方法。袁曦在水浴加熱加熱條件下利用氫氧化鈉溶液將氯化血紅素溶解，冷卻后加入硫酸，晃勻后立即產(chǎn)生棕色沉淀。過濾后取濾液加硫氰酸銨試液數(shù)滴，溶液呈棕紅色。此顯色反應(yīng)可用作氯化血紅素的定性檢測。