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細(xì)胞爬片是什么
閱讀：1477 發(fā)布時(shí)間：2023-1-4細(xì)胞爬片又名爬片，就是讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)，細(xì)胞在玻片上生長(zhǎng)，主要用于組織學(xué)，免疫組織hua學(xué)，冰凍切片，細(xì)胞涂片，原位雜交等,細(xì)胞爬片是根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的需要,使貼壁細(xì)胞在一定的固相表面(如蓋玻片、載玻片)上貼壁生長(zhǎng)而獲得的一種體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)材料。
我們?cè)谧雒庖邿晒猓?/span>IF），激光共聚焦(Confocal)，凋亡檢測(cè)（TUNEL）時(shí)，免不了要制備細(xì)胞爬片，爬片質(zhì)量*決定了后拍照的質(zhì)量以及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的性。
在醫(yī)學(xué)生物研究中，免疫熒光檢測(cè)等需用到細(xì)胞爬片。現(xiàn)有的細(xì)胞爬片多采用表面平整、光滑的透明玻璃玻片。但在做免疫熒光檢測(cè)時(shí)，為了節(jié)約抗體，需免疫組化筆在爬片上進(jìn)行范圍的圈定，將抗體加入劃定區(qū)域，免疫組化筆中的疏水成分阻滯抗體溢出所圈定的范圍，從而達(dá)到節(jié)約抗體的目的。
但在實(shí)際使用過(guò)程中，會(huì)有大量免疫組化筆的成分混入目標(biāo)范圍內(nèi)，且線條粗大，造成樣品數(shù)量減少，同時(shí)混入目標(biāo)范圍內(nèi)的免疫組化筆的成分容易造成背景噪聲及雜質(zhì)影響免疫熒光的結(jié)果，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確。
爬片的準(zhǔn)備:
1、爬片可用一般的蓋玻片，也可用爬片；
2、應(yīng)用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；
3、將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過(guò)夜，第二天先用自來(lái)水沖洗20遍，再用三蒸水沖洗3遍（個(gè)人認(rèn)為主要目的是沖洗干凈就可以了），放在飯盒或者培養(yǎng)皿（一定是玻璃的哦，要不然就……）中烘干后進(jìn)行高壓消毒。
培養(yǎng)板的準(zhǔn)備:
1、泡酸過(guò)夜
2、沖洗，烘干（1、2步驟與前大致相同）
3、放入超凈工作臺(tái)用紫外線照1～2小時(shí)就可以用了（在照之前可以將爬片一并放入，若細(xì)胞貼壁能力不強(qiáng)，可經(jīng)多聚賴(lài)氨酸浸片后放入。貼壁能力強(qiáng)的話，就可以省略了，進(jìn)行紫外線消毒）
注：此步自己的經(jīng)驗(yàn)是爬片可以先浸入消毒后的PBS內(nèi)，緊接著放入培養(yǎng)板內(nèi)。目的：浸過(guò)PBS的爬片依靠表面的液體，可以用培養(yǎng)板孔底貼和緊密，以利于細(xì)胞長(zhǎng)到爬片上。