SVEA進(jìn)口色譜柱的工作原理及如何長(zhǎng)期保存
閱讀:3126 發(fā)布時(shí)間:2021-4-18
SVEA進(jìn)口色譜柱的工作原理:
當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定保留的時(shí)間不同,從而按一定次序由固定相中流出。
SVEA進(jìn)口色譜柱的保存:
?。?)反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):
使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
(2)長(zhǎng)期保存色譜柱:
如色譜柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水中,并將色譜柱附送的堵頭堵上。儲(chǔ)存的溫度較好是室溫。
注意事項(xiàng):
1.如果在本產(chǎn)品中額外再加入終濃度為1×的、新鮮配制的蛋白酶抑制劑復(fù)合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2.如果用于信號(hào)傳遞研究,zuì好在本產(chǎn)品中加入終濃度為1×的、新鮮配制的磷酸酶抑制劑復(fù)合物。
3.整個(gè)裂解步驟都要在冰浴或4℃操作。本產(chǎn)品和PBS均需預(yù)先冷卻。
4.本產(chǎn)品所含有較高濃度的去垢劑會(huì)對(duì)Bradford蛋白濃度測(cè)定有較大影響,因此只能使用BCA法測(cè)定蛋白濃度。