詳細介紹
豬(3β-HSD)試劑盒(ELISA)
產(chǎn)品簡介:
樣本類型:血清、血漿、組織、細胞上清或其他生物樣本
檢測方法:雙抗夾心法
儲藏及保存:2-8度,6個月
檢測原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過氧化物酶標記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品內(nèi)容:
實驗所需儀器及設(shè)備:
實驗操作流程:
第一步:試劑盒室溫平衡 30min ,然后從鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
第二步:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL。
第三步:樣本孔中加入待測樣本 50μL;空白孔不加。
第四步:除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
第五步:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。
第六步:每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
第七步:每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 O.D 值。
注:
豬(3β-HSD)試劑盒(ELISA)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
為了幫助您更好地解決在實驗中可能碰到的各種問題,我們設(shè)計了這些問題指導(dǎo),配以試劑盒內(nèi)的說明書一起供您參考使用。很多因素都將導(dǎo)致免疫測定實驗的失敗,而大多數(shù)技術(shù)失誤是可以通過全面閱讀和準確理解說明書以及實驗步驟來避免的。若對試劑盒內(nèi)的說明書有任何意見和建議,歡迎反饋。我們期待聽到您的聲音,從而完善我們的產(chǎn)品,更好地為您服務(wù)。
◆ 仔細閱讀說明書
◆ 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用。
◆ 按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
◆ 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。
短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存
◆ 準備好所有實驗額外所需物品, (比如移液器,試管,清洗器, 酶標儀)
◆ 按說明書將所用試劑平衡至室溫,根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
◆ 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件,保證所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲。
◆ 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液(比如沉淀或變色)。有些試劑,比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液,可能在設(shè)計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之前,必需充分混勻。而由于沉淀物的特性,在加入酶標板之前,必需不停攪拌。
◆ 保證充分的孵育時間和溫度。
◆ 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
◆ 在混合或溶解蛋白溶液時,避免泡沫產(chǎn)生。
◆ 在實驗開始之前,安排好實驗流程。
◆ 在實驗開始之前,清潔工作臺。
◆ 若有問題,應(yīng)與我公司或代理商進行溝通。