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詳細(xì)介紹
▎ 大鼠內(nèi)皮型（eNOS-3）一步法ELISA用途
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中 eNOS-3 濃度。
▎ 檢測原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。
反應(yīng)類型 | 雙抗夾心法 |
規(guī)格 | 96T/48T |
中文名稱 | 大鼠內(nèi)皮型（eNOS-3）一步法ELISA試劑盒 |
反應(yīng)時間 | 1.5 h |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫吸附測定 |
檢測范圍 | 1.5 U/L – 48 U/L |
靈敏度 | 0.1 U/L |
上樣體積 | 50 μL/孔 |
樣本類型 | 血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本 |
▎ 特異性
可檢測樣本中的eNOS-3 , 且與其它類似物無明顯交叉反應(yīng)。
▎ 重復(fù)性
板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。
▎ 標(biāo)曲圖
▎ 批內(nèi)差
取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測，每份樣本連續(xù)測定20次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
▎ 批間差
選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值
▎ 精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100 CV<10% Inter-批間差: CV<13%
▎ 穩(wěn)定性
經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
▎ 試劑盒的組成
▲未開封試劑盒，4℃保存；已開封，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存，其他4℃保存。
英文名稱 | 中文名稱 | 規(guī)格 | 規(guī)格 |
Microe isa stripplate | 包被微孔板 | 96T | 48T |
Standard | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml/管*6 | 0.3ml/管*6 |
HRP-Corjugate | HRP標(biāo)記抗體 | 10mL | 5mL |
Sample Diluent | 稀釋液 | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionA | 底物液A | 6mL | 3mL |
Chromogen SolutionB | 底物液B | 6mL | 3mL |
Stop Solution | 終止液 | 6mL | 3mL |
20× Wash Solution | 20×濃縮洗滌液 | 25mL | 15mL |
Product Description | 說明書 | 1份 | 1份 |
Sealing film | 封板膜 | 2張 | 2張 |
▎ 實(shí)驗(yàn)所需自備物品
1、450±10nm濾光片酶標(biāo)儀（建議儀器使用前預(yù)熱）
2、高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3、Eppendorf 移液器.
4、蒸餾水或去離子水.
5、脫脂棉吸水紙.
6、37℃恒溫箱.
7、100ml和1000ml量筒.
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