RPA技術(shù)就是重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)，被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最佳反應(yīng)溫度在37°C~40℃左右。
RPA的原理是：重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成，對模板上的目標(biāo)區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。RPA反應(yīng)速度快，用時短，特異性強。
RPA凍干技術(shù)具有很多優(yōu)點：
1、凍干預(yù)分裝：避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的試驗結(jié)果誤差，避免酶等粘稠度高的組份損耗；
2、常溫儲運：*熱穩(wěn)定性，突破冷鏈瓶頸，釋放冷庫空間，減少儲運成本；
3、快速檢測 15min進行單分子檢測試驗。
4、包裝形式簡單，直接使用，對人員操作要求降低，不需要專業(yè)的配液操作人員。
5、 可以選擇包材形式多樣化，能夠降低生產(chǎn)成本。
6、無需熱循環(huán)過程，不需要配置配套的設(shè)備來進行反應(yīng)的準(zhǔn)備。
7、可批量生產(chǎn)，快速高效，特異。
針對RPA試劑的和LAMP及其他核酸試劑的特點，開發(fā)針對性的凍干保護劑配方，設(shè)計合理的凍干曲線，獲得各種凍干形式的RPA凍干試劑.公司的Pilot T系列可以針對該試劑進行凍干，匹配度高，穩(wěn)定性和可靠性好，適用范圍廣，針對溫度和光敏感型物料設(shè)計，功能齊全。系列凍干機可以做成RPA凍干球和凍干粉，適用西林瓶，離心管、芯片盤、托盤、安瓿瓶、PCR八連管等各種容器。
Pilot T系列全功能自動凍干機技術(shù)參數(shù)
型號 | Pilot1-2T | Pilot2-4T | Pilot4-6T | Pilot5-8T | Pilot8-12T | Pilot10-15T |
凍干面積 | 0.1㎡ | 0.2㎡ | 0.42㎡ | 0.56㎡ | 0.84㎡ | 1.05㎡ |
∅22西林瓶裝量（20ML） | ≥210支 | ≥400支 | ≥900支 | ≥1170支 | ≥1500支 | ≥2100支 |
∅16西林瓶裝量（5ML） | ≥410支 | ≥800支 | ≥1700支 | ≥2210支 | ≥3100支 | ≥4100支 |
冷阱溫度（空載） | -85℃ | |||||
真空度（空載） | ≤1Pa | |||||
板層溫度（空載） | -55℃ | |||||
板層制冷方式 | 硅油循環(huán) | |||||
板層數(shù)量 | 1+1 | 2+1 | 3+1 | 4+1 | 4+1 | 5+1 |
板層尺寸（mm） | 375*270 | 375*270 | 350*400 | 350*400 | 350*600 | 350*600 |
捕水能力 | 2L | 4L | 6L | 8L | 12L | 10L |
凍干效率 | 2L/24H | 4L/24H | 3L/24H | 5L/24H | 7L/24H | 10L/24H |
板層間距 | 130mm | 80mm | 100mm | 80mm | 90mm | 100mm |
穿墻隔離 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
凍干曲線擬合度 | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
晶型控制 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
蒸汽分壓控制 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
升華結(jié)束判定 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
凍干終點測試 | √ | √ | √ | √ | √ | √ |
壓塞 | 液壓 | |||||
整機尺寸 （約） | W660*D1200*H1500 | W660*D1200*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1400*H1800 | W860*D1700*H1900 | W860*D1700*H1900 |
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