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腺病毒于1953年從人的增殖腺分離出來(lái)的，是一種無(wú)包膜的DNA病毒，可感染人和畜禽，對(duì)呼吸道、胃腸道、尿道和膀胱、眼、肝臟等均可感染，人腺病毒約1/3的已知血清型通常與人類(lèi)疾病相關(guān)，但一種血清型可引起不同的臨床疾患；相反，不同血清型也可引起同一種疾患。腺病毒是呈二十面體對(duì)稱(chēng)的線性雙鏈病毒，病毒顆粒直徑約65～80nm，由蛋白衣 殼、核心蛋白和DNA組成，腺病毒科分為哺乳動(dòng)物腺病毒屬和禽類(lèi)腺病毒屬，具有嚴(yán)格的寄主特異性，不感染其他動(dòng)物，迄今共發(fā)現(xiàn)100余個(gè)血清型，其中人腺病毒有57種，分為7個(gè)亞群。

腺病毒生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單成本低，對(duì)人致病性小且不誘導(dǎo)癌變，繁殖滴度高，裝載容量大，可以高效轉(zhuǎn)移外源基因至靶細(xì)胞中，使其在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫，因此，重組腺病毒載體廣泛應(yīng)用于基因治療、疫苗開(kāi)發(fā)等生物制藥領(lǐng)域中。

重組腺病毒載體疫苗作為一種新型疫苗，在各種人和動(dòng)物病毒病，細(xì)菌病和寄生蟲(chóng)病、癌癥的免疫預(yù)防中進(jìn)行了大量研究。但是腺病毒載體的應(yīng)用具有局限性：

1、腺病毒對(duì)反復(fù)凍溶敏感，容易失活，且熱穩(wěn)定性差，通常將腺病毒保存于含有 10％甘油的緩沖液中，并于-80℃條件下存儲(chǔ)和運(yùn)輸，以保證腺病毒的活性。-80度運(yùn)輸、保存為腺病毒的發(fā)展和推廣帶來(lái)不方便。

2、臨床使用時(shí)也要求低溫，通常在干冰上進(jìn)行，限制了其使用范圍和條件。

3、因?yàn)楸４鏁r(shí)添加了大量的甘油，需要大量稀釋以減輕甘油的毒性和肌肉注射的疼痛感。

4、溫度的敏感性給運(yùn)輸、保存、使用都提出了極大的挑戰(zhàn)，因此發(fā)展一種冷藏條件下可以運(yùn)輸或者使用的腺病毒載體是新的趨勢(shì)。

由于以上局限性，因此腺病毒凍干、腺病毒冷凍干燥法的應(yīng)用開(kāi)始大量開(kāi)展。凍干法制備腺病毒，就是將腺病毒載體溶液預(yù)先凍結(jié)成固體，然后在低溫低壓下進(jìn)行升華干燥，進(jìn)一步升溫進(jìn)行解析干燥，最終獲得含水量合格活性保持合格的病毒載體制劑。通過(guò)冷凍干燥法制備腺病毒載體制劑具有很多優(yōu)點(diǎn)：

1、凍干是在低溫低壓下進(jìn)行的，避免了高溫對(duì)病毒載體的破壞，特別是腺病毒是溫度敏感性物質(zhì)。

2、避免氧氣氧化有效成分。

3、形成了疏松多孔的結(jié)構(gòu)，具有一定的組織結(jié)構(gòu)和形態(tài)骨架。

4、復(fù)溶速度快，使用方便。

5、含水量低，適合長(zhǎng)期保存和冷藏運(yùn)輸?shù)?，運(yùn)輸和保存的成本大大降低。

凍干法優(yōu)點(diǎn)很多，但是很多凍干的藥品、試劑、微生物等都不能直接凍干，因?yàn)閮龈蛇^(guò)程中也有一定機(jī)械效應(yīng)、溶質(zhì)效應(yīng)、脫水效應(yīng)等，可能導(dǎo)致凍干后活性降低，含量偏低、塌陷、開(kāi)裂等問(wèn)題，要達(dá)到理想的凍干效果，需要合適的凍干曲線和好的凍干配方保護(hù)劑，配合性能穩(wěn)定的凍干設(shè)備才能達(dá)到理想的效果。為了選擇合適的凍干曲線和凍干保護(hù)劑，需要根據(jù)凍干后的外觀、性狀、效價(jià)、含量、檢測(cè)的安全性、保存時(shí)間等進(jìn)行相應(yīng)的不斷調(diào)整配方保護(hù)劑和優(yōu)化凍干曲線。

   腺病毒凍干的保護(hù)劑和其他生物制劑凍干一樣，常用的也是包含糖類(lèi)、多元醇類(lèi)、氨基酸、表面活性劑、聚合物和無(wú)機(jī)鹽等化合物。主要的方法也是一樣的，進(jìn)行配方的篩選組合，通常腺病毒的保護(hù)劑篩選主要注意1、保護(hù)劑要無(wú)免疫原性，沒(méi)有毒性，不能對(duì)后期的使用產(chǎn)生有害的影響。

2、保護(hù)劑應(yīng)該容易溶解，不容易起泡，不產(chǎn)生沉淀，不容易結(jié)晶。

3、凍干過(guò)程和凍干后都可以起到相應(yīng)的保護(hù)作用。

4、不和里面成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，不影響凍干后的活性、檢測(cè)、安全性等。

5、盡量選擇關(guān)鍵溫度高的保護(hù)劑。

推薦腺病毒凍干常用保護(hù)劑如海藻糖、甘露醇、蔗糖、甘氨酸、谷氨酸納、人血白蛋白、右旋糖苷、山梨醇、吐溫80、明膠、PVP、磷酸鹽緩沖液等。采用何種比例，需要根據(jù)凍干后的評(píng)價(jià)進(jìn)行優(yōu)化篩選。