花菁染料簡(jiǎn)介及相關(guān)產(chǎn)品目錄
Jamry
2020-03-30
花菁染料是在兩個(gè)氮原子之間帶有聚methylamine橋的分子,帶有離域電荷:
由于其結(jié)構(gòu),花菁具有非常高的消光系數(shù),通常超過100,000 Lmol-1cm-1。不同的取代基可控制發(fā)色團(tuán)的性質(zhì),例如吸收波長(zhǎng),光穩(wěn)定性和熒光。吸光度和熒光波長(zhǎng)可以通過選擇聚次甲基橋的長(zhǎng)度來控制:更長(zhǎng)的花菁素具有較高的吸光度和發(fā)射波長(zhǎng),直至近紅外區(qū)域。
花菁染料有兩種:非磺化花菁和磺化花菁。對(duì)于許多應(yīng)用,它們是可互換的,因?yàn)樗鼈兊墓庾V特性幾乎相同?;腔头腔腔玖暇捎糜跇?biāo)記生物分子,例如DNA和蛋白質(zhì)。染料之間的區(qū)別在于它們的溶解度:硫化染料是水溶性的,并且它們?cè)谒原h(huán)境中不使用有機(jī)助溶劑進(jìn)行標(biāo)記。它們不易在水中聚集。在某些情況下,需要使用一種類型的花菁。
非磺化花菁
可用的非磺化染料包括Cy3,Cy3.5,Cy5,Cy5.5,Cy7和Cy7.5。 Cy®代表“花菁”,并且第*位數(shù)字表示吲哚基之間的碳原子數(shù)。 Cy2是惡唑衍生物而不是吲哚洛寧,是該規(guī)則的例外。添加后綴.5表示苯并稠合的花菁。結(jié)構(gòu)的變化允許改變分子的熒光性質(zhì),并用幾種熒光團(tuán)覆蓋可見光和近紅外光譜的重要部分。
大多數(shù)非磺化花菁的衍生物(酰肼和胺的鹽酸鹽除外)的水溶性低。 當(dāng)這些分子用于生物分子標(biāo)記時(shí),為了有效反應(yīng),必須使用有機(jī)助溶劑(5-20%DMF或DMSO)。 首先將花菁染料溶解在有機(jī)溶劑中,然后在適當(dāng)?shù)乃跃彌_液中添加到生物分子(蛋白質(zhì),肽,氨基標(biāo)記的DNA)溶液中。 當(dāng)有效地進(jìn)行結(jié)合時(shí),染料在沉淀之前會(huì)發(fā)生反應(yīng)。非磺化花菁的熒光性質(zhì)對(duì)溶劑和周圍環(huán)境的依賴性很小。
磺化花菁
磺化花菁包括促進(jìn)染料分子在水相中溶解的其他磺基。帶電的磺酸鹽基團(tuán)減少了染料分子和重度標(biāo)記的結(jié)合物的聚集。當(dāng)前可用的磺化花菁包括磺基-Cy3,磺基-Cy5和磺基-Cy7。
磺化花菁是高度水溶性的。用這些試劑進(jìn)行標(biāo)記不需要有機(jī)助溶劑。
磺化和非磺化花菁顯示出非常相似的熒光性質(zhì)。但是,應(yīng)注意一些差異。非磺化花菁必須在使用前溶解在有機(jī)助溶劑(DMF或DMSO)中,并添加到目標(biāo)分子在水性緩沖液中的溶液中。對(duì)于Cy3,Cy5,Cy7,推薦的助溶劑體積應(yīng)為10%,對(duì)于.5對(duì)應(yīng)物,應(yīng)為15%。磺基花菁試劑可在純水條件下使用。純化也有區(qū)別:當(dāng)使用水或水性緩沖液透析進(jìn)行純化時(shí),必須使用磺基花菁來有效去除未反應(yīng)的染料。可以通過凝膠過濾,色譜法(HPLC,F(xiàn)PLC,離子交換)或電泳純化與磺基和非磺基花菁的反應(yīng)。
魅羅科技MeloPEG生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)Cyanines系列試劑,可以定制合成Cy-X或Cy-PEG-X類產(chǎn)品(X表示各種活性基團(tuán)或靶向基團(tuán)),相關(guān)產(chǎn)品有(但不僅限):
CY3-COOH
CY3-NHS
CY3-SH
CY3-NH2
CY3-N3
Cy3-Hydrazide
CY3-DBCO
Cy3-Tetrazine
Cy3-TCO
Cy3-PEG-NH2
Cy3-PEG-SH
Cy3-PEG-Biotin
Cy3-PEG-NHS
Cy3-PEG-Mal
Cy3-PEG-DSPE
Cy3-PEG-FA
Cy3-PEG-DBCO
CY5-COOH
CY5-NHS
CY5-SH
CY5-NH2
CY5-N3
Cy5-Hydrazide
CY5-DBCO
Cy5-Tetrazine
Cy5-TCO
Cy5-PEG-NH2
Cy5-PEG-SH
Cy5-PEG-Biotin
Cy5-PEG-NHS
Cy5-PEG-Mal
Cy5-PEG-DSPE
Cy5-PEG-FA
Cy5-PEG-DBCO
CY7-COOH
CY7-NHS
CY7-SH
CY7-NH2
CY7-N7
Cy7-Hydrazide
CY7-DBCO
Cy7-Tetrazine
Cy7-TCO
Cy7-PEG-NH2
Cy7-PEG-SH
Cy7-PEG-Biotin
Cy7-PEG-NHS
Cy7-PEG-Mal
Cy7-PEG-DSPE
Cy7-PEG-FA
Cy7-PEG-DBCO