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          你知道固相多肽合成有哪些步驟么

          閱讀:1069      發(fā)布時(shí)間:2023-2-3
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             你知道固相多肽合成有哪些步驟么?不知道沒(méi)關(guān)系,今天就讓我們一起來(lái)了解一下吧。

            A,樹(shù)脂的選擇及氨基酸的固定

            用于多肽合成的高分子的載體主要有3類(lèi):交聯(lián)聚苯乙烯;聚酰胺:聚乙烯一乙二醇脂類(lèi)樹(shù)脂。氨基酸的固定主要是通過(guò)保護(hù)的氨基酸的羧基同樹(shù)脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵來(lái)實(shí)現(xiàn)。

            B,氨基、羧基、側(cè)鏈的保護(hù)及脫除

            要成功合成具有特定的氨基酸順序的多肽,需要對(duì)暫不參與形成酰胺鍵的氨基和羧基加以保護(hù),同時(shí)對(duì)氨基酸側(cè)鏈上的活性基團(tuán)也要保護(hù),反應(yīng)完成后再將保護(hù)基團(tuán)除去,近年來(lái),F(xiàn)MOC合成法得到了廣泛的應(yīng)用。羧基通常用形成酯基的方法進(jìn)行保護(hù)。甲酯和乙酯是逐步合成中保護(hù)羧基的常用方法。

            C,成肽反應(yīng)

            固相中的成肽反應(yīng)一般是將兩個(gè)相應(yīng)的氨基被保護(hù)的及羧基被保護(hù)的氨基酸放在溶液內(nèi)并不形成肽鍵,要形成酰胺鍵,經(jīng)常用的手段是將羧基活化,變成混合酸酐、活潑酯、酰氯或用強(qiáng)的縮合劑(如碳二亞氨)形成對(duì)稱(chēng)酸酐等方法來(lái)形成酰胺鍵。

            D,裂解及合成肽鏈的純化

            BOC法用TFA+HF裂解和脫側(cè)鏈保護(hù)基,F(xiàn)MOC法直接用TFA,有時(shí)根據(jù)條件不同,其它堿、光解、氟離子和氫解等脫保護(hù)方法也被采用。合成肽鏈進(jìn)一步的精制、分離與純化通常采用高效液相色譜、親和層析、毛細(xì)管電泳等。

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