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          技術(shù)文章

          使用微量量熱法實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物膜代謝

          閱讀:486          發(fā)布時(shí)間:2020-3-3

          使用微量量熱法實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物膜代謝

          代謝的直接測(cè)量可以為生物膜的研究增加新的維度。盡管存在不同的方法,但是微量量熱法具有許多優(yōu)點(diǎn),可以使其適合各種生物膜工作流程。它是非破壞性的,沒(méi)有標(biāo)簽,并且可以實(shí)時(shí)執(zhí)行測(cè)量,從而可以非常動(dòng)態(tài)地顯示生物膜樣品的實(shí)際行為。微量量熱法完成后,可將生物膜樣品用于其他測(cè)定,如基因表達(dá)或顯微鏡檢查,這是一種使用不同方法關(guān)聯(lián)結(jié)果的有效方法。

          生物膜是動(dòng)態(tài)的

          發(fā)表的研究越多,我們就越能看到生物膜是令人難以置信的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。基因表達(dá),生理學(xué)和生物膜形態(tài)一直在變化。用于生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)密度測(cè)量無(wú)法捕捉到這一點(diǎn),并且更復(fù)雜的方法通常需要進(jìn)行端點(diǎn)測(cè)定或使用選擇性染料,這限制了可以收集的信息。微量量熱法提供了一種以非常簡(jiǎn)單的方式查看生物膜動(dòng)態(tài)行為的方法。

          微量量熱法以簡(jiǎn)單的方式捕獲動(dòng)態(tài)代謝信息

          盡管DIY微量熱法并不簡(jiǎn)單,但通常使用商業(yè)儀器。它們通常是臺(tái)式機(jī)器,可讀取由許多小孔組成的微量量熱板。換句話說(shuō),如果您有一個(gè)使用96孔板的實(shí)驗(yàn)性工作流程,則可以使用微量量熱法。演示我們的微量量熱儀的大多數(shù)人,calScreener都對(duì)設(shè)置實(shí)驗(yàn)如此容易感到驚訝。他們很驚訝,因?yàn)樵O(shè)置看起來(lái)不太像96孔板。主要區(qū)別在于每個(gè)孔必須用具有特定張力的蓋密封。起初看起來(lái)很棘手,但是使用我們的扭矩扳手很容易。

          所有孔都被密封的事實(shí)為微量量熱法帶來(lái)了另一個(gè)重要優(yōu)勢(shì),它可以輕松地在不同的缺氧條件下測(cè)量生物膜。

          要求演示

          厭氧測(cè)量生物膜

          在實(shí)驗(yàn)設(shè)置中增加厭氧條件可能會(huì)帶來(lái)很多限制。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須制造特殊的腔室和密封以維持厭氧氣氛。由于我們的calScreener板中孔的緊密密封,如果在厭氧室中制備孔,則即使移開(kāi)板也將保持厭氧狀態(tài)。這意味著您可以在厭氧柜中準(zhǔn)備任何氣氛,并且在整個(gè)代謝實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將自動(dòng)保持該氣氛。

          用真實(shí)樣品進(jìn)行測(cè)量

          許多評(píng)論家抱怨說(shuō),手稿中的實(shí)驗(yàn)并不代表“真實(shí)的”生物膜環(huán)境。作為一種方法,微量量熱法可用于任何樣品。研究小組使用孔底部的瓊脂塞,防護(hù)膜生物膜或懸浮在懸浮液中的珠子來(lái)運(yùn)行它。當(dāng)涉及形成生物膜的基質(zhì)時(shí),微量量熱技術(shù)非常靈活。例如,如果您正在研究臨床生物膜,則甚至可以直接用患者樣品對(duì)從骨骼碎片到定植導(dǎo)管的任何樣品進(jìn)行微量量熱法。實(shí)時(shí)微量量熱法的痕跡就像單個(gè)微生物的可復(fù)制“指紋”一樣,這意味著它也可以用于診斷。

          診斷和即時(shí)護(hù)理

          微量量熱法是一種有趣的診斷技術(shù),因?yàn)閹缀蹩梢允褂萌魏位颊邩悠贰hb于該技術(shù)可以實(shí)時(shí)完成,并且微生物產(chǎn)生*的指紋,因此有意義的是,臨床微生物學(xué)團(tuán)體正在使用微量量熱法同時(shí)在患者樣品上測(cè)試純化的患者分離株。微量量熱法的優(yōu)勢(shì)在于它可以測(cè)量代謝而不是生長(zhǎng)。許多診斷測(cè)定法用于測(cè)量細(xì)菌細(xì)胞是否在分裂,但是生物膜中的細(xì)胞可能是活的且具有代謝活性,而不必生長(zhǎng)。

          代謝不等于增長(zhǎng)

          微量量熱法zui簡(jiǎn)單的應(yīng)用是確定經(jīng)過(guò)特定的實(shí)驗(yàn)處理后生物膜是活的還是死的。我們知道,對(duì)生物的生存能力進(jìn)行明確監(jiān)測(cè)并不能很好地代表生物的生存能力,在生物膜中尤其如此。通過(guò)監(jiān)視整體代謝活動(dòng),即使微生物群落沒(méi)有生長(zhǎng),也可以立即檢測(cè)出微生物活動(dòng)開(kāi)始出現(xiàn)的跡象。

          但是,微量量熱法得到的數(shù)據(jù)非常豐富,以至于可以看到比生物體是活的還是死的更多的信息。由于測(cè)量是實(shí)時(shí)進(jìn)行的,因此可以地看到代謝何時(shí)發(fā)生變化以及對(duì)微生物生理和基因表達(dá)有影響的程度。

          與其他方法不同,微量量熱法可通過(guò)檢測(cè)熱量產(chǎn)生的微小變化來(lái)直接測(cè)量樣品的總代謝量。它不依賴(lài)于諸如呼吸之類(lèi)的代理,并且不受任何特定介質(zhì)或設(shè)置條件的限制。在任何實(shí)驗(yàn)設(shè)置中,微量量熱法都會(huì)隨著時(shí)間的推移再現(xiàn)生物膜總代謝的圖像。

          資料范例

          微量量熱法可以檢測(cè)哪些微生物?

          微量量熱法的靈活性意味著可以測(cè)量的唯yi極限是是否可培養(yǎng)。同時(shí)檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性生物當(dāng)然是可能的。我們已經(jīng)嘗試了許多不同的生物,這是一個(gè)示例列表,它絕不是詳盡無(wú)遺的:

          革蘭氏陰性

          ○ 大腸桿菌

          ○ 銅綠假單胞菌

          ○ 肺炎克雷伯菌

          ○ 鮑曼不動(dòng)桿菌

          ○ 沙門(mén)氏菌

          ○ 變形桿菌

          革蘭氏陽(yáng)性

          ○ 金黃色葡萄球菌

          ○ 肺炎鏈球菌

          ○ 枯草芽孢桿菌

          ○ 海水分枝桿菌

          酵母

          ○ 白色念珠菌

          ○ 釀酒酵母

          使用calScreener監(jiān)測(cè)噬菌體感染也是可能的,它在感染噬菌體以及多種生物膜的生命周期中產(chǎn)生了唯yi的指紋。

          我們有一些示例數(shù)據(jù),但其中大多數(shù)正在準(zhǔn)備發(fā)布。如果您想討論與您的生物有關(guān)的特定示例,請(qǐng)聯(lián)系我們的一位應(yīng)用科學(xué)家。

          聯(lián)系我們的應(yīng)用團(tuán)隊(duì)成員

          微量熱法用于生物膜

          微量量熱法是一種增加生物膜研究規(guī)模的簡(jiǎn)單方法。代謝是微生物群落的重要特征,通常使用代理來(lái)測(cè)量,而代理不能提供真實(shí)情況的完整圖片。該技術(shù)可實(shí)時(shí)測(cè)量通過(guò)代謝產(chǎn)生的熱量,這意味著它*沒(méi)有標(biāo)簽,并且易于應(yīng)用于任何生物或?qū)嶒?yàn)裝置。

          如果您對(duì)該技術(shù)感興趣,但不確定如何將其與您的設(shè)置配合使用,我們目前正在為演示提供應(yīng)用程序。要檢查是否合格并進(jìn)行預(yù)訂,請(qǐng)單擊下面的鏈接。

          使用微量量熱法實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物膜代謝

          代謝的直接測(cè)量可以為生物膜的研究增加新的維度。盡管存在不同的方法,但是微量量熱法具有許多優(yōu)點(diǎn),可以使其適合各種生物膜工作流程。它是非破壞性的,沒(méi)有標(biāo)簽,并且可以實(shí)時(shí)執(zhí)行測(cè)量,從而可以非常動(dòng)態(tài)地顯示生物膜樣品的實(shí)際行為。微量量熱法完成后,可將生物膜樣品用于其他測(cè)定,如基因表達(dá)或顯微鏡檢查,這是一種使用不同方法關(guān)聯(lián)結(jié)果的有效方法。

          生物膜是動(dòng)態(tài)的

          發(fā)表的研究越多,我們就越能看到生物膜是令人難以置信的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)?;虮磉_(dá),生理學(xué)和生物膜形態(tài)一直在變化。用于生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)密度測(cè)量無(wú)法捕捉到這一點(diǎn),并且更復(fù)雜的方法通常需要進(jìn)行端點(diǎn)測(cè)定或使用選擇性染料,這限制了可以收集的信息。微量量熱法提供了一種以非常簡(jiǎn)單的方式查看生物膜動(dòng)態(tài)行為的方法。

          微量量熱法以簡(jiǎn)單的方式捕獲動(dòng)態(tài)代謝信息

          盡管DIY微量熱法并不簡(jiǎn)單,但通常使用商業(yè)儀器。它們通常是臺(tái)式機(jī)器,可讀取由許多小孔組成的微量量熱板。換句話說(shuō),如果您有一個(gè)使用96孔板的實(shí)驗(yàn)性工作流程,則可以使用微量量熱法。演示我們的微量量熱儀的大多數(shù)人,calScreener都對(duì)設(shè)置實(shí)驗(yàn)如此容易感到驚訝。他們很驚訝,因?yàn)樵O(shè)置看起來(lái)不太像96孔板。主要區(qū)別在于每個(gè)孔必須用具有特定張力的蓋密封。起初看起來(lái)很棘手,但是使用我們的扭矩扳手很容易。

          所有孔都被密封的事實(shí)為微量量熱法帶來(lái)了另一個(gè)重要優(yōu)勢(shì),它可以輕松地在不同的缺氧條件下測(cè)量生物膜。

          要求演示

          厭氧測(cè)量生物膜

          在實(shí)驗(yàn)設(shè)置中增加厭氧條件可能會(huì)帶來(lái)很多限制。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須制造特殊的腔室和密封以維持厭氧氣氛。由于我們的calScreener板中孔的緊密密封,如果在厭氧室中制備孔,則即使移開(kāi)板也將保持厭氧狀態(tài)。這意味著您可以在厭氧柜中準(zhǔn)備任何氣氛,并且在整個(gè)代謝實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將自動(dòng)保持該氣氛。

          用真實(shí)樣品進(jìn)行測(cè)量

          許多評(píng)論家抱怨說(shuō),手稿中的實(shí)驗(yàn)并不代表“真實(shí)的”生物膜環(huán)境。作為一種方法,微量量熱法可用于任何樣品。研究小組使用孔底部的瓊脂塞,防護(hù)膜生物膜或懸浮在懸浮液中的珠子來(lái)運(yùn)行它。當(dāng)涉及形成生物膜的基質(zhì)時(shí),微量量熱技術(shù)非常靈活。例如,如果您正在研究臨床生物膜,則甚至可以直接用患者樣品對(duì)從骨骼碎片到定植導(dǎo)管的任何樣品進(jìn)行微量量熱法。實(shí)時(shí)微量量熱法的痕跡就像單個(gè)微生物的可復(fù)制“指紋”一樣,這意味著它也可以用于診斷。

          診斷和即時(shí)護(hù)理

          微量量熱法是一種有趣的診斷技術(shù),因?yàn)閹缀蹩梢允褂萌魏位颊邩悠?。鑒于該技術(shù)可以實(shí)時(shí)完成,并且微生物產(chǎn)生*的指紋,因此有意義的是,臨床微生物學(xué)團(tuán)體正在使用微量量熱法同時(shí)在患者樣品上測(cè)試純化的患者分離株。微量量熱法的優(yōu)勢(shì)在于它可以測(cè)量代謝而不是生長(zhǎng)。許多診斷測(cè)定法用于測(cè)量細(xì)菌細(xì)胞是否在分裂,但是生物膜中的細(xì)胞可能是活的且具有代謝活性,而不必生長(zhǎng)。

          代謝不等于增長(zhǎng)

          微量量熱法zui簡(jiǎn)單的應(yīng)用是確定經(jīng)過(guò)特定的實(shí)驗(yàn)處理后生物膜是活的還是死的。我們知道,對(duì)生物的生存能力進(jìn)行明確監(jiān)測(cè)并不能很好地代表生物的生存能力,在生物膜中尤其如此。通過(guò)監(jiān)視整體代謝活動(dòng),即使微生物群落沒(méi)有生長(zhǎng),也可以立即檢測(cè)出微生物活動(dòng)開(kāi)始出現(xiàn)的跡象。

          但是,微量量熱法得到的數(shù)據(jù)非常豐富,以至于可以看到比生物體是活的還是死的更多的信息。由于測(cè)量是實(shí)時(shí)進(jìn)行的,因此可以地看到代謝何時(shí)發(fā)生變化以及對(duì)微生物生理和基因表達(dá)有影響的程度。

          與其他方法不同,微量量熱法可通過(guò)檢測(cè)熱量產(chǎn)生的微小變化來(lái)直接測(cè)量樣品的總代謝量。它不依賴(lài)于諸如呼吸之類(lèi)的代理,并且不受任何特定介質(zhì)或設(shè)置條件的限制。在任何實(shí)驗(yàn)設(shè)置中,微量量熱法都會(huì)隨著時(shí)間的推移再現(xiàn)生物膜總代謝的圖像。

          資料范例

          微量量熱法可以檢測(cè)哪些微生物?

          微量量熱法的靈活性意味著可以測(cè)量的唯yi極限是是否可培養(yǎng)。同時(shí)檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性生物當(dāng)然是可能的。我們已經(jīng)嘗試了許多不同的生物,這是一個(gè)示例列表,它絕不是詳盡無(wú)遺的:

          革蘭氏陰性

          ○ 大腸桿菌

          ○ 銅綠假單胞菌

          ○ 肺炎克雷伯菌

          ○ 鮑曼不動(dòng)桿菌

          ○ 沙門(mén)氏菌

          ○ 變形桿菌

          革蘭氏陽(yáng)性

          ○ 金黃色葡萄球菌

          ○ 肺炎鏈球菌

          ○ 枯草芽孢桿菌

          ○ 海水分枝桿菌

          酵母

          ○ 白色念珠菌

          ○ 釀酒酵母

          使用calScreener監(jiān)測(cè)噬菌體感染也是可能的,它在感染噬菌體以及多種生物膜的生命周期中產(chǎn)生了唯yi的指紋。

          我們有一些示例數(shù)據(jù),但其中大多數(shù)正在準(zhǔn)備發(fā)布。如果您想討論與您的生物有關(guān)的特定示例,請(qǐng)聯(lián)系我們的一位應(yīng)用科學(xué)家。

          聯(lián)系我們的應(yīng)用團(tuán)隊(duì)成員

          微量熱法用于生物膜

          微量量熱法是一種增加生物膜研究規(guī)模的簡(jiǎn)單方法。代謝是微生物群落的重要特征,通常使用代理來(lái)測(cè)量,而代理不能提供真實(shí)情況的完整圖片。該技術(shù)可實(shí)時(shí)測(cè)量通過(guò)代謝產(chǎn)生的熱量,這意味著它*沒(méi)有標(biāo)簽,并且易于應(yīng)用于任何生物或?qū)嶒?yàn)裝置。

          如果您對(duì)該技術(shù)感興趣,但不確定如何將其與您的設(shè)置配合使用,我們目前正在為演示提供應(yīng)用程序。要檢查是否合格并進(jìn)行預(yù)訂。

           

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