詳細(xì)介紹
美國Advanced Biomatrix life support 用于FRESH生物3D打印的支撐膠
生命支持®
用于FRESH生物打印的支持漿液
目錄#5244
生命支持®是新鮮生物打印的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。FRESH代表懸浮水凝膠的自由形式可逆嵌入。每個生命支持®打印工具包帶有4個單位2克無菌生命支持的®粉末。只需重新懸浮,離心并打印即可!
產(chǎn)品描述
生命支持®是新鮮生物打印的核心部件和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
FRESH代表懸浮水凝膠的自由形式可逆嵌入。
每個生命支持®打印工具包帶有4個單位2克無菌生命支持的®粉末。一克粉末水合到大約10毫升的FRESH載體材料中。
閱讀使用生命支持開創(chuàng)性的出版物®這里: science.sciencemag.org/content/365/6452/482
參數(shù),測試和方法 | 生命支持® #5244 |
滅菌方法 | 輻照 |
無菌-USP修改 | 沒有增長 |
形成 | 接地粉 |
生物印刷 | 支持Lifeink®膠原蛋白生物打印 |
平均粒徑 | 15-50微米 |
包裝尺寸 | 8克粉末(4 x 2克) |
流變學(xué) | 賓漢塑料性能 |
保質(zhì)期 | 自收到之日起至少6個月 |
原始資料 | 牛明膠 |
美國Advanced Biomatrix life support 用于FRESH生物3D打印的支撐膠
使用說明
下載完整的PDF版本 或繼續(xù)閱讀以下內(nèi)容:
1.將所需重量的LifeSupport ™ 粉末轉(zhuǎn)移到50 mL無菌錐形離心管中(建議重量見表2)。每個離心管的重量不要超過2.1克。
2.將所需的粉末稱入50 mL離心管中,然后按照表2所示添加推薦量的COLD介質(zhì)。注–這些體積用于 填充 印版,并非所有打印都需要。例如,印刷平腳手架可能只需要將盤子部分裝滿。
表2:
印花碟 | 粉末重量 | 媒體量 |
35毫米碟 | 1.0克 | 17毫升 |
6孔板 | 2.10克 | 35毫升 |
12孔板 | 0.86克 | 15毫升 |
24孔板 | 0.43克 | 7毫升 |
可以定制LifeSupport™以適合您的特定生物墨水。
請參見下面的表3,以幫助您選擇正確的懸浮介質(zhì),以充分利用FRESH生物打印的*優(yōu)勢。
表3:
生物墨水 | 懸浮 媒體 | 離心分離 |
中和的 膠原蛋白 | 細(xì)胞培養(yǎng)基或1X PBS | 2000G *; 5分鐘 |
海藻酸鹽 | 0.1 wt%氯化鈣 | 2000G;5分鐘 |
纖維蛋白原 | 凝血酶的媒體 | 2500G *; 5分鐘 |
基質(zhì)膠 | 細(xì)胞培養(yǎng)基或1X PBS | 2000G *; 5分鐘 |
酸性膠原蛋白 | 50 mM HEPES緩沖液(pH 7.4) | 2000G;5分鐘 |
去細(xì)胞ECM | 細(xì)胞培養(yǎng)基或1X PBS | 2000G *; 5分鐘 |
*注:離心速度和時間可能會因懸浮介質(zhì)而略有不同。基于血清的生長培養(yǎng)基需要更高的離心速度(即2500-3000G)
3.渦旋1分鐘,確保所有粉末*重懸,然后靜置10分鐘,使粉末*重新水化。
4.根據(jù)表3離心支撐材料。
5.支撐材料應(yīng)在管子底部壓緊。 倒出上清液。
6. 使用無菌刮刀或其他裝置將壓緊的LifeSupport ™漿液以無菌方式sc 入所需的印刷皿中。避免在漿液中引入大氣泡。如果將碟子放在側(cè)面,則泥漿不應(yīng)移動。
您已準(zhǔn)備好進行新鮮生物打印。
打印建議:
1.將LifeSupport ™ 支持漿液放入3D生物打印機中。
2.在菜盤底部(z)和中部(x,y)附近校準(zhǔn)(零)針。見下文。
注意:與典型的打印不同,針不必接觸或什至靠近培養(yǎng)皿的底部。 無論從何處開始,LifeSupport ™支持漿液都會將打印原位捕獲。確保打印容器足夠大,以免在打印過程中針刺入墻壁。
3.現(xiàn)在可以開始生物打印。確保容器不會在打印床上移動。
注–可以在同一容器中打印多個構(gòu)造,以使每個LifeSupport ™ 套件的打印數(shù)量zui大化。
印刷后建議:
1.印刷后,將印刷的構(gòu)建物在37°C下孵育至少30分鐘,以使LifeSupport ™ 漿液融化并釋放生物印刷的構(gòu)建物。
2.打印到基于細(xì)胞培養(yǎng)基的支持材料中的細(xì)胞化生物墨水可以在需要交換培養(yǎng)基之前直接放置在細(xì)胞培養(yǎng)箱中24小時(確保適當(dāng)?shù)腃O2水平)。
3.打印后孵育30分鐘后,LifeSupport ™ 漿液將*融化并釋放您的打印結(jié)構(gòu)。大體積可能需要更長的時間才能*融化。
4.轉(zhuǎn)移生物打印的構(gòu)建體:
4a。小心地將生物打印的構(gòu)建體轉(zhuǎn)移到所需的細(xì)胞培養(yǎng)基中。
4b。作為替代方案, 可以將熔化的LifeSupport ™漿液連續(xù)替換為預(yù)熱的細(xì)胞培養(yǎng)基,以避免處理印刷的構(gòu)造物。例如,如果您打印到6孔板上,則可以通過小心地吸出2 mL熔化的LifeSupport ™ 并添加2 mL預(yù)熱的細(xì)胞培養(yǎng)基來完成。重復(fù)此過程,直到所有熔化的LifeSupport ™ 漿料都已被介質(zhì)替代。
5.根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)方案繼續(xù)進行標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基更換。
LifeSupport ™ 由FluidForm在卡耐基梅隆大學(xué)(Carnegie Mellon University)10,150,258的許可下制造。