Single cardiomyocyte contractility force assay，單個心肌細胞收縮力測定系統(tǒng)

iPSC-CM鈣瞬變鈣瞬態(tài)監(jiān)測分析系統(tǒng)

讀數(shù)

單軸收縮力，與力測量耦合的鈣瞬變分析。

標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)限制

當(dāng) hESC-心肌細胞在標(biāo)準(zhǔn)條件下培養(yǎng)時，即在 2D 單層細胞中，它們以完隨機的方式組織。因此，無法量化單個心肌細胞跳動產(chǎn)生的單軸力。

單一心肌細胞收縮力測定的好處

在此測定中，衍生的心肌細胞附著在矩形細胞粘附區(qū)域，這會誘導(dǎo)細胞伸長并促進兩個相鄰微柱之間的懸浮細胞錨定。收縮力測定能夠在體外再現(xiàn)導(dǎo)致 CM 跳動的興奮-收縮耦合效應(yīng)。

例子

hESC 心肌細胞中鈣瞬變（鈣敏感收縮蛋白的激活）的量化以及細胞收縮和力生成的同時測量（支柱偏轉(zhuǎn)分析）。

提供力量化分析設(shè)備-微柱陣列細胞力量化分析系統(tǒng)

微柱培養(yǎng)陣列及其特點：

●每張陣列尺寸為3.2 x 3.2 mm，含10 x 18個觀測點，每個觀測點有170個按六邊形排列的微柱

●微柱直徑5 μm，高15 μm，中心間距為12 μm

●微柱彈力范圍1-3 nN（有其他需求可定制）

●標(biāo)準(zhǔn)涂層是纖維連接蛋白或膠原蛋白I

●細胞外基質(zhì)（EDM）蛋白包可按找需求定制

軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細胞圖片中提取細胞力學(xué)參數(shù)（力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等）（圖3）。分析結(jié)果可保存為Excel表格，便于后續(xù)處理。

圖3

測量原理：

未變形的微柱在明場圖片中呈較亮的圓形，周圍是較暗的邊，通過霍夫變換可得到其形心。發(fā)生變形的微柱呈較暗的半月形，通過圖像處理可得到微柱的形變大?。▓D1）。由于微柱剛度已知，所以進而可得到每根微柱產(chǎn)生的力。

系統(tǒng)組成：

1、熒光倒置顯微鏡：

主要用于常規(guī)活細胞成像，快速高靈敏度活細胞熒光成像，主要包括顯微平臺，成像系統(tǒng)，工作站

2、微柱陣列培養(yǎng)設(shè)備：

將硅膠微柱陣列刻在蓋玻片上（圖1 A），并包被蛋白，然后置于培養(yǎng)皿中（圖1 B）。微柱上需要包被蛋白。標(biāo)準(zhǔn)的包被蛋白有纖連蛋白或I型膠原。若需其他包被蛋白，需提前告知。每張微柱陣列可以分析120-150個細胞，得到的數(shù)據(jù)足以進行統(tǒng)計學(xué)分析。每種實驗條件可進行2-3次實驗，這樣得到的結(jié)果會更加穩(wěn)定。微柱陣列本身并未進行包被，在使用前需要自行包被合適的蛋白（用戶自選，可購常用的包被蛋白）。

3、光學(xué)減震臺

4、預(yù)裝MicroPost細胞牽引力、內(nèi)源力分析軟件的計算機系統(tǒng):

軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細胞圖片中提取細胞力學(xué)參數(shù):（力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等）；

做細胞如下力學(xué)特性分析，包括：

1)、微柱形變；

2)、細胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布

3)、細胞牽引力、內(nèi)源力(cell active force)

4)、主動收縮力

我們提供帶有微型PDMS微柱的10毫米蓋玻片，用于細胞培養(yǎng)和力評估。

不同的支柱設(shè)計和布置適合各種應(yīng)用，例如牽引力顯微鏡，收縮力和旋轉(zhuǎn)軸。
通過測量PDMS微柱響應(yīng)于細胞施加的力的撓度來進行力評估。
>可用
直接接種細胞
>多種設(shè)計可供選擇
可用高密度和低密度微柱以及不同縱橫比的基板。
>兼容高分辨率顯微鏡。
易于觀察細胞及其對微柱變形的影響

各種微柱陣列并可以定制：

1、圓形PDMS微柱10 mm蓋玻片：

標(biāo)準(zhǔn)尺寸：24 mm圓形蓋玻片（約170μm厚度）
設(shè)計：直徑為5um； 中心到中心的距離為7um
三種高度可供選擇：2um，6um和12um

2、帶狀柱子的蓋玻片：

在相同的蓋玻片上，有兩個大小不一的微柱狀帶狀分布（厚度為1毫米）

設(shè)計帶1：直徑為4um； 中心到中心的距離為8um

設(shè)計帶2：直徑為2um； 中心到中心的距離為4um

兩種高度可供選擇：2um和6um

3、方形微柱蓋玻片
設(shè)計：直徑7.5um； 微柱之間的距離為20um
三種高度可供選擇：2um，6um和12um

4、可定制的直徑、高度、間距

相關(guān)產(chǎn)品：

1、 hiPSC心肌細胞肌節(jié)功能分析系統(tǒng)

2、心肌細胞高通量鈣瞬態(tài)分析

3、 高通量心肌細胞、心肌組織、肌肉收縮多功能量化跟蹤分析系統(tǒng)

4、細胞力產(chǎn)生和力傳遞綜合測量分析系統(tǒng)

5、各種生物力學(xué)設(shè)備

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